蛋白质糖类脂质及实验鉴定.pptVIP

还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定实验 在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部，放入盛50℃～65℃温水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部； 斐林试剂不稳定，应现用现配。 * * 实验原理 生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。 (1)糖类 淀粉+碘→蓝色 还原糖+斐林试剂 50~65℃水浴加热 约2 min 砖红色沉淀 (2)脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色 脂肪＋苏丹Ⅳ染液→红色 (3)蛋白质＋双缩脲试剂→紫色 实验流程 (1)还原糖的检测和观察 选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织 结论：组织样液中有可溶性还原糖 (2)脂肪的检测和观察 方法一：花生种子匀浆＋3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色 方法二： 取材：花生种子(浸泡)，将子叶削成薄片 结论：花生种子中有脂肪存在 脂肪的鉴定中，实验用的花生种子需提前浸泡3～4 h， 浸泡时间太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形。 (3)蛋白质的检测和观察 选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液 ?结论：组织样液中存在蛋白质 在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂 发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试 管也不易洗刷干净. 还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。 (1)实验材料的选择 由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质，因此在 实验的选材上应注意以下两点： ①材料本身应无色，以免对结果产生干扰； ②材料应富含相关物质，使现象更显著。 (2)斐林试剂与双缩脲试剂的比较 斐林试剂 双缩脲试剂 鉴定成分 还原糖 蛋白质 鉴定原理 还原糖中的醛基(—CHO)在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2＋还原成Cu＋，从而生成砖红色的Cu2O沉淀 双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)在碱性溶液中能与Cu2＋结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键 斐林试剂 双缩脲试剂 试剂浓度 甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液； 乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液 A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液； B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 使用方法 甲液、乙液混合均匀后，再加入样液 先加A液造成碱性 环境，再加B液 使用条件 加热(水浴50～65℃) 不加热，摇匀即可 实验现象 浅蓝色→棕色→砖红色 紫色 斐林试剂 双缩脲试剂 使用方法 甲液、乙液混合均匀后，再加入样液 先加A液造成碱性 环境，再加B液 使用条件 加热(水浴50～65℃) 不加热，摇匀即可 实验现象 浅蓝色→棕色→砖红色 紫色 习题 2、连线题： 苏丹Ⅲ染液 豆浆 砖红色沉淀 斐林试剂 马铃薯汁 橘黄色 双缩脲试剂 葡萄汁 蓝色 碘液 花生子叶 紫色 基础题1.（1）√；（2）X。 典例印证 (2010·茂名质检)根据相关实验，回答下列问题： (1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试剂 是　　　　，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成 沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液 中　　　　的含量。 (2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双 缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。 其中双缩脲试剂B的量只有3～4滴，而不能过量，为 什么？ 。 [解析]　还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试，也可用班氏试剂，原理是相同的：还原糖的—CHO将Cu(OH)2的Cu2＋还原为Cu＋。在蛋白质鉴定中，NaOH的作用是制造蛋白质与Cu2＋形成络合物的碱性条件，若Cu2＋