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原子荧光光谱法测水产品中汞形态（二）【来源/作者】北纳创联 1. 结果与讨论1.1高效液相色谱条件的优化按照 GB 5009.17–2014 中汞形态分析的方法配制流动相： 称取 0.5 g L- 半胱氨酸、 2.2 g 乙酸铵， 置于 500 mL 容量瓶中， 用水溶解， 加入 25 mL 甲醇，以水定容至 500 mL。经 0.45μm 滤膜过滤后， 于超声水浴中超声脱气 30 min。以乙酸铵作为缓冲盐， 可以控制溶液的 pH 值，所以本实验未调节流动相的酸度。L- 半胱氨酸是一种具有良好水溶性的离子对试剂， 其分子结构中的巯基络合作用较强， 能够跟汞离子结合， 从而加速其洗脱， 并能够使色谱峰峰形更加对称。甲醇作为流动相中的有机改性剂， 其含量直接影响流动相的极性， 进而影响各组分的保留行为和色谱峰峰形。对汞形态混合标准溶液 （其中无机汞和甲基汞的质量浓度均为10 ng／mL） 进行测定， 研究了甲醇体积分数变化 （0～10%） 对无机汞和甲基汞的色谱峰保留时间、 半峰宽、 峰高和峰面积的影响。实验发现， 使用所选浓度范围内的甲醇时， 无机汞、 甲基汞和乙基汞都能很好的分离。流动相中甲醇含量变化对无机汞的测定有以下影响： (1) 无机汞亲水性较强， 所以最先洗脱， 甲醇含量变化对无机汞的色谱保留时间影响较小； (2)甲醇含量增加会使无机汞的色谱峰逐渐变宽， 峰高先增大后会有所下降， 峰面积先增大然后有所下降（在甲醇体积分数为 5% 时色谱峰面积最大） 。流动相中甲醇含量变化对甲基汞的测定有以下影响： 随着甲醇含量的增加， 流动相对甲基汞的洗脱能力增强， 甲基汞的色谱保留时间逐渐缩短， 色谱峰逐渐变窄， 峰高持续增大， 色谱峰面积先增大，在甲醇体积分数为 5% 时至最大， 之后会有所下降。综合考虑， 流动相中甲醇的体积分数选为 5%。1.2紫外消解效率紫外线可以使有机汞分子中的 R–Hg 键断裂，提高汞的氧化还原效率。文献报道紫外线能起到催化作用， 在线加入氧化剂有利于甲基汞响应值的提高。设置紫外灯开和关、 氧化剂是否在线加入， 条件交叉共 4 种试验方案， 配制无机汞和甲基汞混合标准溶液， 无机汞和甲基汞的质量浓度均为 10ng／mL， 在 4 种方案下分别对混合标准溶液进行测试， 试验结果见图 1。结果表明， 在 4 种状态下， 无机汞的色谱响应值基本没有变化； 在紫外灯照射并在线加入氧化剂的情况下， 甲基汞的色谱响应值最大； 没有紫外灯照射或者没有氧化剂的加入， 甲基汞的灵敏度都会有一定程度的降低； 在关闭紫外灯和不加氧化剂的情况下， 甲基汞响应值最低； 在紫外灯照射不加氧化剂的情况下， 甲基汞的色谱峰面积测定值的重复性较差。由此可见， 在甲基汞的分析过程中， 紫外灯照射和氧化剂的加入都是在线紫外消解的必要条件。1.3氧化剂的选择在汞形态分析过程中， 常用的氧化剂有高锰酸钾、 过硫酸钾。使用高锰酸钾作为氧化剂时， 容易在管路内壁生成二氧化锰， 既会造成管路堵塞又会对汞元素产生吸附。本实验选择使用极为广泛的过硫酸钾作为氧化剂。试验了 1～20 g／L 的过硫酸钾溶液对无机汞和甲基汞色谱峰面积的影响。结果表明： 随着氧化剂浓度的增大，无机汞和甲基汞的色谱峰面积都是先增大后有下降趋势。当氧化剂质量浓度为 2 g／L时响应值最大。这可能是因为当氧化剂加入量过少时， 不足以把甲基汞完全氧化， 所以响应值较低； 当氧化剂加入量过大时， 其与还原剂发生氧化反应， 降低了体系中还原剂的浓度， 不能很好地将氧化态的汞还原为汞蒸气， 使得响应值降低。综合考虑， 选择氧化剂质量浓度为 2 g／L。1.4载流液试验了体积分数 1～10% 的盐酸对无机汞和甲基汞色谱响应值的影响， 结果表明： 盐酸体积分数为 1% 时， 两组分的响应值均较低， 这可能是由于酸度较小时， 氢化反应速率低， 导致响应值偏低； 随着盐酸浓度的增大， 无机汞和甲基汞的响应值都逐渐增大。综合考虑， 选择载流液为体积分数 10% 的盐酸溶液。1.5还原剂　　在汞形态分析时需要的还原剂 （KBH 4 溶液） 浓度不宜太高， 因为还原剂只是将汞还原为汞原子， 而不需要进一步将汞原子变为氢化物。试验了 1～20 g／L 的 KBH 4 溶液对无机汞和甲基汞色谱响应值的影响。结果表明： 在所选择的浓度范围内， 当还原剂质量浓度为 2 g／L 时， 无机汞和甲基汞的色谱峰面积均为最大。当 KBH 4 溶液的质量浓度为 1 g／L 时， 二者的响应值都偏低， 这可能是由于氢化反应效率较低， 不能将所有的氧化态汞还原； 当 KBH 4溶液的浓度较高时， 可能是由于反应过程中产生大量的氢气， 稀释了原子化器中汞原子浓度， 使得信号偏低。故选择还原剂质量浓度为2 g／L。1.6载气流量