动物生物化学课件生物催化剂——酶.ppt

? 酶促反应动力学：研究酶促反应 速度及其影响因素。 ? 反应速度：单位时间内底物减少 或产物增加的速度，常用初速度来 衡量。 5. 酶促反应的动力学 概念： 影响酶促反应速度的因素： ?反应温度 ?pH 值 ?酶浓度[E] ?底物浓度[S] ?抑制剂I ?激活剂A 最适温度（optimum T）：使酶促反应速度达 到最大时的温度。 最适温度因不同的酶而异，动物体内的酶的最 适温度在37~400C左右。 酶的最适温度并非酶的特征性常数，它与底物、 作用时间等因素有关。 5.1 温度对酶促反应速度的影响 5. 酶促反应的动力学 酶反应的温度曲线和最适温度 5.2 溶液pH值对酶促反应速度的影响 5.酶促反应的动力学 最适pH（optimum pH）：使酶促反应速度达 到最大时溶液的pH。 pH影响酶分子解离状态。 pH影响底物的解离，从而影响酶与底物的结合。 极度pH的条件引起酶蛋白的变性。 酶的最适pH 一般在7 左右。也有很多例外，如胃蛋白 酶的最适pH只有1.5，胰蛋白酶(7.8)。 酶的最适pH并非酶的特征性常数，它与底物的种类、 浓度等因素有关。 在其他条件确定时，当底物浓度大大超过酶浓度 时，反应速度与酶的浓度成正比。 5.3 酶浓度对酶促反应速度的影响 5.酶促反应的动力学 0.2 Vm 2 0.1 例-- 变-- [S]与v关系： 当[S]很低时，，[S]?与v?成比例-- 一级反应 当[S]较高时，，[S]?与v?不成比例 当[S]很高时，，[S]?，v不变--零级反应 0 1 2 3 4 5 6 7 8 [S] 5.酶促反应的动力学 5.4 底物浓度对酶促反应速度的影响 v Vm 0.3 米-曼氏方程式 （Michaelis-Menten equation） V= Vmax [S] Km + [S] 米-曼氏方程解释： 当[S]??Km时，v=(Vmax/Km) [S], 即v 正比于[S] 当[S]??Km时，v ?Vmax, 即[S]?而v不变 V= Vmax [S] Km + [S] Km的意义 米氏常数Km=(k2+k3)/k1 ? Km等于酶促反应速度为最大速度一半时的底物浓度。所以Km的单位为浓度单位。 ? Km是酶的特征性常数，可表示酶与底物的亲和力。 在反应的起始阶段，k３k２，Ｋm≈k２／k1　≈１／Ｋ平≈Ｋ解离 Ｋm越大，说明Ｅ和Ｓ之间的亲和力越小，ＥＳ复合物越不稳定。 Ｋm越小，说明Ｅ和Ｓ的亲和力越大，ＥＳ复合物越稳定，也越有利于反应。 E + S ES E + P K3 K4 K1 K2 Vmax 2 ? Vmax ? [S] Km ? [S] Km = [S] 所以采用双倒数作图法：即 1/v - 1/[S] 作图 1 V max 1 [S] ? ? ? Km Vmax 1 v Km值与 Vmax值的测定 v-[S]作图法： Vmax难以测定，不能从v?V/2处求得，从而导致Km 也难确定。 1 V max 1 [S] ? ? ? Km Vmax 1 v 5.5 抑制剂对酶促反应速度的影响 5. 酶促反应的动力学 酶的抑制剂（inhibitor）:凡能使酶的活性下降 而不引起酶蛋白变性的物质。 抑制作用可分为： 可逆抑制作用和不可逆抑制作用两大类。 （一）可逆抑制作用（reversible inhibition） 抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活 性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析、超滤等物理 方法被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性。 根椐抑制剂与酶结合的情况，又可以分为竞争 性抑制、非竞争性抑制等。 1、竞争性抑制作用（competitive inhibitor） 某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争 酶的活性中心并与之结合，从而减少了酶与底物的 结合，因而降低酶反应速度。这种作用称为竞争性 抑制作用。 竞争性抑制的动力学特点是 Vmax不变，而 Km增大 竞争性抑制的特点： ? I与S分子结构相似； ? Vmax 不变，Km增大； ? 抑制程度取决于I与E的亲和力 ，以 及[I]和[S]的相对浓度比例； ? 增大[S]可减轻或消除抑制作用. 例1：丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。 这种抑制作用可通过增加底物浓 度而使整个反应平衡向生成产物的方向移动，因而能 削弱或解除这种抑制作用。 琥珀酸 延胡索酸 丙二酸 例2：磺胺类药物的抑菌作用 H2N H2N COOH 对氨基苯甲酸 SO2NHR 磺胺类药物 对氨基苯甲酸 二氢喋呤啶 谷氨酸 二氢叶酸合成酶 二氢叶酸还