细胞工程基本技术.ppt

血球计数板 计数法 细胞固定与染色观察 细胞固定 甲醇-醋酸 FAA Carnoy 细胞染色 苏木精-伊红（H.E)染色法 Giemsa染色法 Feulgen染色法 考马斯蓝染色法 免疫荧光法 免疫过氧化物酶染色法 凋亡细胞观察 形态观察: 生化分析: 锚定蛋白:检测凋亡早期 PI:检测晚期或死细胞 分子技术:梯形电泳图谱 形态观察 PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面 FITC-AnnexinV染色 FITC-AnnexinV和PI染色 梯形电泳图谱 染色体分析 样品处理:秋水仙素 低渗处理 固定化 染色观察 细胞分离 细胞初步分离 差速离心分离法 单个细胞的获得 软琼脂培养法 和 有限稀释法 显微操作分离法 流式细胞仪分离 激光捕获显微切割 免疫磁珠分离 琼脂平板培养 琼脂平板（培养淋球菌） 多孔板培养 流式细胞仪原理 激光捕获显微切割 免疫磁珠分离 细胞保存与复苏 目前广泛应用的细胞保存方法是低温冷冻保存法 预保留细胞经消化分散后，加入冷冻保护液，同时将细胞悬液稀释 按1ml/安瓿分装细胞悬液，在火焰下将安瓿封口。 将封口的安瓿放入慢冻机内，按1℃/min的速度缓慢冷冻，使温度降至-25℃ 冻结好的安瓿放入CO2低温冰柜或液氮罐中，温度达-150—- -190 ℃ 如果需要复苏，可将安瓿取出后立即放入37 ℃水浴中，使其快速融化 思考题 植物组织