《生物工程专业分析》实验指导书.docVIP

《专业分析》 实验指导书 适用专业 生物工程 贵州大学 二OO 年月  前 言 本实验是针对于生物工程专业分析课程开设的，主要内容是通过实验使学生更好的掌握专业分析课堂授课的内容，更直观的了解各类生物工程样品的分析方法和理论原理。在实验中要求学生熟练掌握分析的基本实验操作技能和方法；对学生进行实际样品的分析测定操作训练，使学生掌握获得正确分析数据的基本过程和基本方法，切实培养他们分析问题和解决问题的能力。要求学生在实验中应用课堂讲授的理论知识，勤于动手、动脑，实验中认真观察记录现象及结果，做好实验报告。 具体试验项目有游离氨基酸测定、蛋白质测定、粗脂肪测定、还原糖测定、总酸总酯测定、铜的测定、酶活力测定、阿贝折射仪的使用等。其中蛋白质测定为综合性实验。  目 录 实验一：游离氨基测定???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????4 2、实验二：白酒中总酸的测定 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????6 3、实验三：白酒中总的测定 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????8 4、实验四：粗脂肪含量测定????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????10 5、实验五：的测定????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????13 6、实验六：铜含量测定????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????16 7、实验七：波美计、密度计及阿贝折射仪的使用?????????????????????????????????????????????????18 8、实验八：酶活力测定????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????22 9、实验九：蛋白质含量测定????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????25 10、附件一：实验报告基本内容要求????????????????????????????????????????????????????????????????????28 11、附件二：实验报告格式??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????12、附件三：实验注意事项??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????3实验 一 ： 游离氨基测定 实验学时：3学时 实验类型：验证 实验要求：必修 一、实验目的 掌握甲醛法测定游离氨基的测定原理和方法。 二、实验内容 使用甲醛滴定法测定游离氨基 三、实验原理 氨基酸中的NH2基的pK值常在9.0以上，不能和NaOH标准溶液直接滴定。但可以用甲醛法测量。在pH中性和常温条件下，甲醛迅速与氨基酸中的(-氨基相互作用，使滴定终点移至pH值9.0左右，可以用酚酞批示剂，以NaOH标准溶液来滴定NH3+基上的H+,每释放一个氢离子，就相当于有一个氨基氮 R-NH3+→H++R-NH2 R-NH2+2HCHO→R-N(CH2H)2 滴定的结果表示游离a—氨基的含量，其精确度可达理论量的90%。如果样品中只某一种已知的氨基酸，从甲醛法结果可求得该氨基酸的含量。如果样品中是多种氨基酸的混合物(如蛋白水解液)，则测定结果不能作为氨基酸的定量依据。一般常用此法测定蛋白质水解程度，随着水解程度的增加滴定值增加，当水解完全后，滴定值即保持恒定。甲醛滴定法采用的甲醛浓度为2.0-3.0mol/L，即滴定后最终浓度为6 %-9 %。 四、实验组织运行要求 集中授课形式 五、实验条件 1．试剂 (1)40％中性甲醛溶液: 在50mL