中药化及学.ppt

第四节 离子交换色谱 (ion-exchange column chromatography，IEC) 离子交换色谱原理 离子交换色谱基本构成要素 影响离子交换的主要原因 离子交换色谱的操作技术 离子交换色谱的应用 一、原理 离子交换色谱法是以离子交换树脂作为固定 相，用水或水溶性溶剂作为流动相。在流动 相中的离子型成份与树脂上的同电荷离子进 行交换而被吸附，再用带有同种电荷的溶剂 进行洗脱，来分离离子型化合物的一种色谱 方法。 分离机理是利用样品组分的选择性系数不同而进 行分离。 R-A++B+ R-B++A+ 当平衡时： K= 若K1，说明树脂对B比A有更大的亲和力　 　 离子交换色谱 若以R代表离子交换树脂的母体，则其色谱分离的基本原理可表示为： 阳离子交换树脂 RSO3-H+＋Na+Cl- RSO3-Na+＋H+ + Cl- 阴离子交换树脂 RN+OH-＋Na+Cl- RN+Cl-＋Na+ + OH- 要求离子交换可逆，树脂可再生。 二、构成要素 （一）固定相 　　固定相是离子交换剂，分离子交换树脂和硅 胶化学键合离子交换剂两类。 离子交换树脂简介：立体网状结构的高分子 多元酸或多元碱的聚合物。　 　 离子交换树脂的分子结构中，由两大部分构 成：稳定的网架及网架上的交换基。 　　 1、分类： 　　　根据交换基结合离子的性能不同将离子交换树脂分为两类：　 　　阳离子交换树脂 　　阴离子交换树脂　 商品树脂的类型：钠盐（阳离子型）和氯型（阴离子型），而交换时用的是氢型和氢氧型。 阳离子交换树脂：强酸型—SO3  弱酸型—COOH、—PO3H2 阴离子交换树脂：强碱型 　2、组成　 　　　离子交换树脂由树脂母体和交换基团构成。常见的是聚苯乙烯树脂作为母体。 　 3、离子交换层析的原理：交换基上的活性离子（H+或OH-）在水溶液中与其它阴、阳离子的可逆交换来达到逐步分离的目的。 　　　　　 　　　当两种（或两种以上）不同的可交换物质离子通过离子交换树脂柱时， 各不同成分的亲和力不同，在柱上的交换速度也不同，被洗脱的时间也就不同，从而达到分离目的。 4、? 离子交换树脂的性能： 　　交联度：离子交换树脂中所含的交联剂的 百分含量。 　　例如：上海树脂厂生产的聚苯乙烯强酸型 阳离子交换树脂，从其产品牌号：　732（强酸 1×7）可以得知，交联度为7%（1×7）。 交联度越大，网眼越小、网隙越小，交换 的离子越小。　 　　　交换容量：单位质量的离子交换树脂中所含交换基团的毫摩尔数。单位为mmol/g。 　　　 交换容量是用来表示离子交换树脂进行交换离子的能力大小的，其数值大小决定于以树脂表面及网状结构内部所含的交换基的多少。 溶胀性：指树脂吸收水分后，浸润膨胀能力的大小 离子交换色谱 （二）流动相： 多是具一定pH和离子强度的缓冲溶液， 如磷酸盐缓冲液。有时加入少量的有机溶 剂提高选择性，如甲酸、乙酸、碱等做成 的缓冲液。 （三）被分离成分： 必须能被分离成离子成分。即具有一 定的离子强度。 三、影响离子交换的因素 （一）成分 离子化程度越高越好。 （二）温度 越高越好，但要注意不能破坏成分。 （三）溶剂 极性越高越好。 （四）浓度 越低越好。 四、离子交换色谱的技术操作 树脂的预处理 装柱 上样交换 洗 脱 四、操作技术 （一）树脂的预处理 含义：将市售的含有杂质的树脂，处理去除杂质，并转为交换使用的类 型的过程。 方法：市售的阳离子交换树脂均为钠型，要转为氢型备用。 市售的阴离子交换树脂均为氯型，要转为氢氧型备用。 1 、浸蒸馏水中1～2天。 2、10倍量2mol/lHCl 浸2～3h，再用蒸馏水洗至中性。 3、……………..NaOH………………………………….。 4、交叉重复1、2。 注意：阳树脂先2后3，三酸两碱，共五次。 　　　 阴………3…2，…碱