生物样及本分析.ppt

背景 样品前处理是目前分析化学的瓶颈，是分析化学研究的难点和热点问题之一。由于样品数量极多，且分析物含量越来越低、基体越来越复杂，迫切要求发展高通量、高选择性、高效率的在线样品前处理技术。因此，开展这方面的研究具有极为重要的意义。 提高回收率的手段 有必要使与蛋白质结合的药物游离出来 与蛋白质结合的药物，在除蛋白质处理时，药物也与蛋白质一起被除去，药物回收率降低。 切断蛋白质结合（离子结合，疏水结合） 调整样品导入溶液的pH值 碱性药物时，使用pH值低的溶液? 酸性药物时，使用pH值高的溶液? 调整样品导入溶液的离子强度 20-100mM的缓冲液浓度 在样品导入溶液中添加有机溶剂 在20%以内使用有机溶剂（防止由蛋白质的变性而产生的析出） 使用界面活性剂 　　 (*) 从药物保持（使用反相柱）的方式看，有抑制药离子化的pH 值较为理想。 方法 我们研究开发出优质的限制性通路媒介（RAM）预柱，应用柱切换HPLC系统及其在线稀释旁路系统，可对血浆直接进行药物分析。 我们的系统 …. Co-Sense for BA 何谓Co-Sense for BA 用于分析生物样品的应用系统 具有在线稀释旁通流路的自动前处理系统和新开发的前处理柱 Shim-Pack MAYl-ODS的组合，实现了真正的血浆（血清）的直接大量注入。 特长 可对应蛋白质结合率高的药物 使用样品导入用溶液的在线稀释的应用，即使是蛋白质结合率高的药物且在大量注入时 也可有效地捕集，回收率几乎100%。 超高速进样和无限接近零的交叉污染。 -使用高效自动进样器 迅速且有效地除去蛋白 有效地保护分析柱色谱柱和LC/MS的接口 经久耐用的新型柱 通过采用新开发的涂覆技术和粒子径的最优化，可得到长期稳定数据。 不同进样体积的影响 在线稀释泵提高回收率的原因 Shim-pack MAYI-ODS （RAM）预处理柱 采用Shim-pack MAYI-ODS除蛋白 预处理柱 column name ; Shim-pack MAYI-ODS packing material ; silica particle outer surface methyl cellulose inner surface octadecylsilyl group particle size ; 50mm column size ; 4.6mm i.d. x 10mm pH range ; 2 - 7.5 maximum pressure ; 20MPa Co-Sense for BA的流路构成 在线自动稀释用旁通流路的效果 用蛋白结合率较高的消炎痛进行评价 无稀释旁通流路：回收率约50%。 有稀释旁通流路：回收率几乎100% 自动浓缩带来的高灵敏度 实现高灵敏度的大量注入的稳定性 捕集效率 即使注入血浆500?L，回收率也几乎达到100%。 峰形状 样品名：添加消炎痛的血浆 出色的柱使用寿命 连续注入时的稳定性 血浆基底的洗脱 从稳定的MAYL-ODS洗脱蛋白质等血浆基底 峰及回收率 稳定的峰形状及回收率（几乎100%） Co-Sense for BA-LCMS系统的特长 通过在Co-Sense for BA系统上连接LCMS-2010EV，成为更强有力的生物样品分析系统　　 LCMS所具有的高选择性检测，在有复杂的基底的生物样品的分析中，发挥威力。 Co-Sense for BA-LCMS分析血浆样品 通过在Co-Sense for BA系统上连接LCMS-2010EV，成为更强有力的生物样品分析系统　　 LCMS所具有的高选择性检测，在有复杂的基底的生物样品的分析中，发挥威力。 耐用性 (Chromatogram) 耐用性 (柱压) 利多卡因的分析 线性关系 重现精度 Co-Sense for BA＆MAYI-ODS柱的总结 高通用性 通过采用在线稀释旁通，可广泛地对应蛋白结合率高的药物 有效地除去蛋白质 采用新开发的涂覆技术，实现稳定有效的除蛋白 经久耐用 通过粒子径的最佳化，提供长期可靠的数据 与LCMS连接，更强有力的生物样品分析系统诞生 MS强化药物鉴定功能 1 :倍他乐克 m/z 268 2 :普萘洛尔 m/z 260 3 :利多卡因 m/z 235 4 :狄布卡因 m/z 344 5 :布比卡因 m/z 289 1 2 3 4 5 1mg/mL each, 5mL SIM chromatograms of standards each 1ug/mL, 5uL 重现性 标准 血浆中的药物 倍他乐克 95.0% 普萘洛尔 97.4% 利多卡