三角褐指藻富油培养条件的优化及活性物质分析.pdfVIP

摘要 本文选择三角褐指藻为实验材料，采用一种新式的平板光生物反应器对三角褐指藻 进行培养。采用单因素实验方法比较了不同光径、盐度、氮素浓度、温度等培养条件下 的藻细胞生长动力学曲线、生长速率及生物量的差异。采收不同培养条件下稳定期的三 角褐指藻细胞，测定藻细胞内油脂、蛋白质、多糖的含量；结合藻细胞生物量及油脂含 量计算油脂产量；并设计正交实验，对富集藻油的培养条件进行优化。 反应器光径与细胞密度、比生长速率、生物量、单位体积产量呈负相关，与单位面 积产量呈正相关。窄光径培养的三角褐指藻更有利于油脂的积累，5cm 光径培养的藻细 胞生物量和油脂含量均显著高于其他各组，分别达到 1.82g/L 和 31.54%，因而其单位体 积油脂产量极显著的高于其他各实验组（p ﹤0.01 ）。 盐度过高或过低对三角褐指藻生物量及脂肪积累均有极显著影响（p ﹤0.01 ）。三角 褐指藻在 17‰-70‰的盐度范围内均可以生长，低盐胁迫与高盐胁迫下，比生长速率、 生物量均降低。在低盐度 17‰和高盐度 70‰ 的海水中培养的藻细胞，其最高细胞密度 比正常海水盐度 35‰培养组分别降低了 9.6%和 22.6% 。盐度 35‰下，生物量及油脂含 量最高，且油脂产量极显著（p ﹤0.01 ）地高于其他各组，单位体积产量为47.67mg·L-1·d-1 ， 单位面积产量为 2.38g·m-2·d-1 。 以硝酸钠为氮源，氮素浓度对三角褐指藻生长的影响显著（p ﹤0.05 ）。在一定浓度 范围内，比生长速率和生物量均随着氮素浓度的升高而增大，氮素浓度高达 4.72mmol/L 时，指标有所下降。低氮浓度可促进脂肪的积累，其油脂含量比高氮浓度下提高了 39.79% 。氮素浓度对生物量和油脂含量的影响趋势不同，综合考虑生物量和油脂含量的 大小，得出在 2.36mmol/L 时油脂产量最高，单位体积产量为27.26mg·L-1·d-1 ，单位面积 -2 -1 产量为 1.36g·m ·d 。 在实验所设置的温度范围内，三角褐指藻在 10℃~22 ℃能正常生长，在 27 ℃时细胞 停止生长并最终大量死亡。藻细胞的比生长速率、生物量均在 16℃时达到最高，随着温 度的继续上升而降低。低温能促进三角褐指藻脂肪积累，10℃时藻细胞油脂含量比22 ℃ 时提高了27.37% 。由于低温不利于藻细胞的生长，因而 10℃比 16℃的油脂产量降低了 28.52% 。 探究不同培养条件下生物量与脂肪积累趋势的同时，本实验分析测定了各培养条件 下藻细胞内蛋白质和多糖的含量，以期在全面了解培养条件对三角褐指藻细胞内代谢影 响规律的基础上，归纳出最有利于藻细胞油脂产量的培养条件。 i 4 通过 L (3 ) 的正交实验，确定出使三角褐指藻油脂产量最高的培养条件为盐度35‰、 9 温度 16℃、氮素浓度 0.59mmol/L 、光径 5cm ，此条件下的油脂单位体积产量为 50.13mg·L-1·d-1 ，单位面积产量为2.51g·m-2·d-1 。 关键词：三角褐指藻，光径，盐度，氮素浓度，温度，油脂产量，营养成分 ii Abstract Culture conditions of oil-enriching algae, Phaeodactylum tricornutum were optimized in flat plate photobioreactors. The differences of the growth kinetics curve, specific growth rates and biomasses under the culture conditions of different light paths of reactors, salinities, nit