MicroCal等温滴定微量热仪.PDF

GE医疗中国 MicroCal 等温滴定微量热仪 MicroCal iTC200 / Auto-iTC200 / VP-iTC 等温滴定微量热 Isothermal Titration Calorimetry （ ） 等温滴定微量热 ITC 是一种直接测量生物分子 。 结合过程中的放热或者吸热的技术 通过对热量的测 定 （ ）， 可以精确的得到结合常数 KB 反应的化学计量 数 （）， （ ） （ ）， n 熵 ΔS 和焓 ΔH 在单次实验中即可 提 。 供一整套有关分子相互作用的完整信息 ITC是表征 生物分子相互作用的经典方法之一。 ： 、 、 、 ITC 的应用范围包括 小分子 蛋白 抗体 核 、 ； 酸 脂类及其他生物分子之间的相互作用特征鉴定 ； 。 酶动力学 分析因分子结构改变导致的结合变化等 ， 、 在全球 MicroCal 仪器被普遍应用于制药厂商 、 。 生物技术公司以及众多大学 科研院所和政府机构 工作原理 ， ITC可主要分为两个部分 上部是控制滴定的注射 ， 。 系统 下部是样品池和微量热系统 “ ” ， 注射器装载实验检测用的 配体 溶液 样品池 “ ” 。 ， 中含有待检测的另一种 大分子 样品 实验时 在 ： 。 图1.典型ITC数据图 上半部分表示每次注射采集的数据 下半部 ， 恒定的温度下 配体溶液以设定的体积和次数逐滴进 （ ） 分表示每次注射的释放的热量 上图中每个峰的面积积分 对滴 入样品 。 池中 两者发生相互作用时释放或吸收的热量 定样品与样品池中样品的摩尔比作图 。 和两者结合的数量之间存在间接比例关系 通过灵敏 ， 的热量检测系统和功率反馈补偿机制 便可准确的检 ， 测到反应过程中极其微小的的热量变化 并以实时的 数据曲线形式输出。 当样品池中的大分子逐渐被滴入的配体所饱和 ， ， 时 相互作用产生的热量信号会逐渐减小 直到最后 仅能检测到配体滴入时产生的背景稀释热量。 ， 输出的曲线经过软件分析 便可得到全面完整的 热动力学数据。 图2.ITC功率反馈补偿机制 2 iTC200TM 等温滴定微量热仪 仅需200 l样品即可获得完美数据 ， （ ） 对于测量生物分子间的相互作用 等温滴定微量热 ITC 技 。 术可谓是一项经典方法 ITC在单次实验中即可测定所有的结合参 （