油菜内生枯草芽孢杆菌BY-2抗油菜菌核病菌有效成分的鉴定和分离提纯.PDFVIP

2006年 12 月 中国油料作物学报 2006, 28 (4) : 453—456 Ch ine se jou rnal of o il crop science s 油菜内生枯草芽孢杆菌 BY - 2抗油菜 菌核病菌有效成分的鉴定和分离提纯 1, 2 , 3 2 1 江木兰 , 赵 　瑞 , 王国平 ( 1. 华中农业大学植物科技学院; 2. 中国农业科学院油料作物研究所 ; 3. 国家油料作物遗传改良重点实验室 ,湖北 武汉 430070) ( ) 摘要 :油菜内生枯草芽孢杆菌 B acillus subtilis BY - 2产生 2种类型的抗真菌物质 ,一种是挥发性的物质 ,可以 有效地抑制油菜菌核病菌的生长 ;另一种是分泌到培养液中的物质 。重点研究第二类抗菌物质的提取和纯化分析 ( ( ) ) 方法 。试验证明 BY - 2 产生和积累高效抑制油菜菌核病菌 S clerotin ia sclerotiorum L ib. de B ary 生长的细胞外分 泌型物质 ,其发酵上清液与油菜菌核病菌对峙培养形成了 2. 8cm 的抑菌圈;采用离心收集发酵液上清液 、调节酸性 条件 、甲醇溶解和 Sep hadex G25葡聚糖凝胶柱层析等方法 ,可以沉淀 、萃取收集和纯化该物质 ,而且收集率高 、活性 强 、纯度高 。 关键词 : 内生枯草芽孢杆菌 ; 抗真菌物质 ; 分离提纯 ; 油菜菌核病菌 中图分类号 : S476　文献标志码 : A 　 文章编号 : 1007—9084 (2006) 04 —0453—04 ( ) 　　枯草芽孢杆菌 B acillus subtilis 是 自然界广泛 于油菜菌核 。 ( 存在 、对人畜无毒无害 、不污染环境 、对植物的非致 Sep hadex G25 葡聚糖凝胶 100 - 300 目, p har 病细菌 [ 1 ] 。枯草芽抱杆菌在生长和繁殖过程中可 ) ( ) m acia 和层析柱 1 ×60cm , Pharm acia B io system s 购 以产生多种抗菌物质 ,这类微生物产生的抗菌物质 自华顺生物技术公司 ;所有化学试剂均为分析纯或 引起了各国的研究工作者极大的兴趣和关注 [ 2 , 3 ] 。 色谱纯 。 枯草芽孢杆菌产生的抗菌物质大多为低分子抗生 1. 2　挥发性抗菌物质的鉴定 素 ,关于这类抗生素的研究主要集中在医学领域 ,近 将病原真菌和拮抗细菌 B Y - 2 分别接种在装 年来国内在农业上利用枯草芽孢杆菌活体菌防治农