青霉素发酵工艺教学大全.pptVIP

前言 青霉素又被称为青霉素G、peillin G、 盘尼西林、配尼西林、青霉素钠、苄青霉素钠、青霉素钾、苄青霉素钾。青霉素是抗菌素的一种，是指从青霉菌培养液中提制的分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素，是第一种能够治疗人类疾病的抗生素。青霉素类抗生素是β-内酰胺类中一大类抗生素的总称 青霉素简介 古法制青霉素 天然法制青霉素 工厂工艺 1 2 3 4 青霉素简介 1929年英国学者弗莱明首先在抗生素中发现了青霉素。 青霉素类抗生素是β-内酰胺类中一大类抗生素的总称，由于β-内酰胺类作用于细菌的细胞壁，而人类只有细胞膜无细胞壁，故对人类的毒性较小。 但其青霉素类抗生素常见的过敏反应在各种药物中居首位，发生率最高可达5％～10％ 古法制青霉素 1、用棉签取青霉放入培养基）中培养7-10天以增加青霉的量。 2、从繁殖的青霉中提取药效成分 3、用纸层析法进行提纯 4、检验药性 * 取青霉 用棉签取青霉（一般指青霉属。常见于腐烂的水果、蔬菜、肉食及衣履上，多呈灰绿色。亦能引起柑橘的青霉病。有些种类如点青霉（P.notatum）和黄青霉（P.chrysogenum）等可提取青霉素，药用青霉素又称盘尼西林）放入培养基（芋头煮成的汁混合用米磨成的汁或用玉米浆）中培养7-10天以增加青霉的量。 * 从繁殖的青霉中提取药效成分 （1）将培养液放在漏斗中过滤（把霉菌和液体全部倒入） （2）注入菜油，搅拌均匀→分层 （3）取下层（由于青霉为水溶性物质） （4）剔除青霉素溶液中的不溶性物质 * （5）在碳粉中注入煮沸的纯净蒸馏水→过滤（去除液体中的不纯物质） （6）再倒入用白醋做成的酸性水（由于青霉素为弱酸性物质，不溶于酸性水） （7）再倒入碱性的苏打水→青霉素就会溶解出来 （8）提取完毕→提纯 ×30 * 用纸层析法进行提纯 （1）在划线处图上青霉素→风干 （2）将纸吊在以酸二碱八比例配置的缓冲液中，靠近划线处端浸入液体 （3）溶液将会通过毛细管作用渗透在纸上→干燥后的青霉素和不纯物质会由于Rf值的不同而分开 （4）等纸带干燥后，去青霉素Rf值线附近纸带 （5）检查药性 * 检验药性 （1）把葡萄球菌放入琼脂培养基培养，带葡萄球菌出现后放入一块浸润的青霉素试纸 （2）若几天后试纸周围出现空白说明有药效（周围葡萄球菌被青霉素杀死） * 天然法制青霉素 （1）培养7-10天→得青霉菌孢子培养物→用无菌水将孢子制成悬浮液接种到种子罐内已灭菌的培养基中 （2）通入无菌空气，搅拌，27℃下培养24-28小时 （3）将种子培养液接种到发酵罐已灭菌的含有苯乙酸前体的培养基中，通入无菌空气，搅拌，在27℃下培养7天 （4）在发酵过程中需补入苯乙酸前体及适量培养基 （5）冷却，过滤，滤液在PH2-2.5的条件下，于萃取机内用醋酸丁酯进行多级逆流萃取 （6）将萃取液转入PH7.0-7.2的缓冲液中，再转入丁酯中 （7）将丁酯萃取液经过活性炭脱色，加入成盐剂 （8）共沸蒸馏即可得青霉素G钾盐。 * 工厂工艺制青霉素 1、工艺流程 （1）丝状菌三级发酵工艺流程 冷冻管（25°C，孢子培养，7天）——斜面母瓶（25°C，孢子培养，7天）——大米孢子（26°C，种子培养56h,1:1.5vvm）——一级种子培养液（27°C，种子培养，24h,1:1.5vvm）——二级种子培养液（27~26°C,发酵,7天,1:0.95vvm）——发酵液。 * （2）球状菌二级发酵工艺流程 冷冻管（25°C，孢子培养，6~8天）——亲米（25°C，孢子培养，8~10天）——生产米（28°C，孢子培养，56~60h,1:1.5vvm）——种子培养液（26~25-24°C，发酵，7天，1：0.8vvm）——发酵液。 * 2、工艺控制 影响发酵产率的因素 （1）基质浓度 （2）温度 （3） pH 值 （4）溶氧 （5）菌丝浓度 （6）菌丝生长速度 （7）菌丝形态 * * 3、 工艺控制要点 （1）种子质量的控制 （2）培养基成分的控制 a. 碳源 b. 氮源 c. 前体 d. 无机盐加人的无机盐 （3）发酵培养的控制 a. 加糖控制 b. 补氮及加前体 c. pH 值控制 d. 温度控制 。e. 溶解氧的控制 f. 泡沫的控制 g. 发酵液质量控制 Thank You