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- 2017-10-05 发布于湖北
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实验一
植物根尖细胞有丝分裂的制片与观察
一、实验目的
掌握根尖有丝分裂制片技术,熟练有丝分裂全过程并
观察染色体形态特征。
二、原理
有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。在有丝分裂过程
中,细胞核内染色体准确复制、均等分裂,使母、子细胞
在遗传物质组成上达到等质同量。既维持个体正常生长发
育,又保证物种的连续性和稳定性。
高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位
的分生组织,将这些分生组织固定、水解、染色和压片,
再置于显微镜下即可观察到大量处于有丝分裂各时期的细
胞和染色体。
二、原理
有丝分裂期主要分为四个连续的过程:
前期:染色体缩短变粗,核仁逐渐消失,核膜开始崩解
中期: 染色体分散排列赤道板上,纺锤体形成
后期: 着丝粒分裂为二,姐妹染色单体分离移向两极
末期: 核的重建,细胞分裂为二,子细胞形成。
三、材料
大蒜根尖(2n=16 ):数目少,个体比较大,易观察。
四、方法步骤
取材:根尖长到2-3 cm长时,10时左右取材。
固定:卡诺固定液(无水乙醇 :冰醋酸= 3 :1 )
→固定4 小时~7天→95% 乙醇冲洗2次→70% 乙醇
中长期保存
水洗:蒸馏水洗20分钟(换三次蒸馏水),洗去固定液。
水解:在1 mol/L HCl中,(60 ±1 )℃水解6 min。水解后用蒸馏水洗
去HCl 。
酶解:加入酶(2.5%果胶酶 :2.5%纤维素酶= 1 :1 ),恒温箱
(20 ~25 ℃)中酶解15分钟。
染色:滴加卡宝品红染色5 min ~10 min。
五、观察结果—— 大蒜根尖有丝分裂
五、观察结果—— 大蒜根尖有丝分裂
五、结果观察
观察有丝分裂间、前、中、后、末各时期,及早中期染色
体形态结构,并绘图。
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