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- 2017-10-05 发布于河北
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微专题突破
一、与核酸有关的各种酶的比较
名称 作用 参与生理过程应用作用位点(如下图)连接酶连接两个DNA片段基因工程限制性核酸内 切割某种特定的脱氧核苷酸序列
DNA聚合酶 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 DNA复制 a 聚合酶 在核糖核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 转录及复制解旋酶 使碱基间氢键断裂形成单个脱氧核苷酸链 DNA复制及转录b 逆转录酶 以RNA为模板合成DNA 逆转录、基因工程a
1.在DNA连接酶的催化下形成的化学键和位置分别是( )氢键 碱基与脱氧核糖之间氢键 碱基与碱基之间磷酸二酯键 磷酸与脱氧核糖之间磷酸二酯键 脱氧核糖与碱基之间【解析】 本题考查DNA连接酶的作用。DNA连接酶的作用只是催化DNA片段的“缝合”能恢复被限制酶切开了的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键不能催化氢键形成。【答案】 C2.下列黏性末端属于同种限制性核酸内切酶切割而成的是( )
A.①② B.①③【解析】 同种限制酶切割形成的黏性末端碱基能互补配对。【答案】 B3.下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )
A.①②③④ B.①②④③
C.①④②③ D.①④③②
【解析】 将DNADNA片段的是限制性核酸内切酶即①;DNA聚合酶则可以催化DNA单链的合成即④;DNA连接酶可以连接具有相同黏性末端或平口末端的两个DNA片段即②;解旋酶催化DNA双螺旋氢键的断裂使DNA分子解旋即③。【答案】 C二、DNA复制、PCR技术和DNA重组技术的比较
DNA复制 PCR技术 DNA重组技术 场所 细胞核 生物体外 生物体外 酶 解旋酶、聚合酶DNA聚合酶限制性核酸内切酶、DNA连接酶载体 不需要 不需要 需要 遵循原则 碱基互补配对碱基互补配对碱基互补配对结果 DNA分子 DNA分子片段DNA分子
4.(2016·新乡高二测试)下列有关PCR技术的说法不正确的是( )是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术技术的原理是DNA双链复制利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA【解析】 PCR是利用DNA双链复制的原理将基因的核苷酸序列不断地加以复制使其数量呈指数方式增加。利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知的目DNA受热变性后解旋为单链引物与单链相应互补序列结合然后在DNA聚合酶作用下进行延伸如此重复循环多次。【答案】 D5.以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析下列说法正确的是( )
催化①RNA聚合酶过程发生的变化是引物与单链DNA结合催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶都能耐高温如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%则一个双链DNA中与U之和也占该DNA碱基含量的40%【解析】 据图分析可知过程分别表示反转录、DNA的复制、变性、复性和延伸。①过程由反转录酶催化完成;④过程表示当温度降至55~60 ℃时引物结合到互补DNA链上。②过程表示DNA的复制需在常温条件Taq酶催化作用下从引物起始进行互补链的合成需在70~75 ℃的高温条件下进行但催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶;在DNA分子中有T无U。【答案】 B6.请回答基因工程方面的有关问题。(1)利用PCR技术扩增目的基因其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片断它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推A的DNA片段所占的比例为________。在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图)请分别说明理由。
①第1组:_______________________________________________;第2组:_______________________________________________。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能这是因为。
(4)用限制性核酸内切酶、单独或联合切割同一种质粒得到的DNA片段长度如下图(1 kb即个碱基对)请画出质粒上、的切割位点。
【解析】 (1)①依据图解特点第四轮循环产物中可以得到16个DNA分子其中有14个含引物A、B的DNA分子一个只含有引物B的DNA分子和一个只含引物A的DNA分子。②从图解原DNA与引物A、B的比例关系分析经三次复制后开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)比较第1组引物的碱基顺序可以发现引物Ⅰ与引物Ⅱ有两对碱基能发生互补配对形成局部双链结构而失效;而第2组引物中引
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