5.1 DNA的粗提取与鉴定 5.pptVIP

情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 * 专题5　DNA和蛋白质技术　　　　　　　　　　　　　 　　　　　课题1　DNA的粗提取与鉴定 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 DNA的提取是现代生物技术进行中药鉴别的最关键步骤。总DNA的有效提取要求材料中的DNA尽可能少地降解。但用于生药真实性鉴别的药材在干燥、加工、贮藏等过程中均造成了DNA不同程度的降解，一般DNA的含量也比较低。药材中次生代谢产物含量较高，会干扰提取。另外也可能有微生物引起的外源DNA的污染。DNA的质量将直接关系到实验的成败。不同的研究目的对DNA的纯度和量的要求不尽相同。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 请思考： 1．DNA是怎样提取的？ 2．DNA是怎样进行鉴定的？ 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 1．DNA的粗提取 (1)基本思路：利用DNA与______、________和______等在物理和化学性质方面的______，提取DNA，去除其他成分。 (2)方法和原理： ①DNA和________等其他成分在不同浓度的______溶液中溶解度不同，利用这一特点选择适当的________就能使DNA充分溶解，而使______沉淀，或者相反，以达到分离目的。 一、DNA的粗提取和鉴定 RNA　 蛋白质　 脂质　 差异　 蛋白质　 NaCl　 盐浓度　 杂质　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 ②DNA不溶于______，但是某些______则可溶于其中。 ③______能水解蛋白质，但是对______没有影响。 ④大多数蛋白质不能忍受________的高温而发生变性，而DNA在________以上才会变性。 ⑤________能瓦解细胞膜，但对DNA无影响。 酒精　 蛋白质　 蛋白酶　 DNA　 60～80 ℃　 80 ℃　 洗涤剂 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 2．DNA的鉴定 在沸水浴的条件下，DNA遇________会被染成蓝色。 二苯胺 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 二、实验设计 1．选取实验材料 选用______________的生物组织，成功的可能性更大。 2．破碎细胞，获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的________，同时________________，过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞，需要先用________溶解________。 DNA含量较高 蒸馏水　 用玻璃棒搅拌　 洗涤剂　 细胞膜 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 3．去除滤液中杂质 (1)方案一：通过控制________的浓度去除______。 (2)方案二：直接向滤液中加入____________，反应10～15 min，________中的____________能够分解蛋白质。 (3)方案三：将滤液放在__________的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围，使________沉淀析出而________分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。 NaCl溶液　 杂质　 嫩肉粉　 嫩肉粉　 木瓜蛋白酶 60～75 ℃　 蛋白质　 DNA 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 4．DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于冷却的________这一原理，可从______中析出较纯净的DNA，此时DNA的状态为____________。 5．DNA的析出与鉴定 (1)DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液体积相等的、______的______溶液。 95%酒精　 滤液　 白色丝状物 冷却　 酒精　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 (2)DNA鉴定：鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为________的NaCl溶液5 mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物，各加入二苯胺________。 在沸水浴的条件下，DNA遇__________会被染成蓝色，因此______