第13篇基因表达调控08级.ppt

第 一 节基因表达调控的基本概念 本节学习主要知识点： 基因表达、管家基因的概念。 基因及基因组的概念； 基因表达的时间、空间特异性； 基因表达的方式：基本表达、诱导和阻遏、协调表达。 基因是携带特定遗传信息的DNA片断，其结构组成有：DNA编码序列、非编码调节序列和内含子。 基因是生物遗传的基本单位，也就是编码一种RNA,进而编码一种多肽的信息单位。 由mRNA反转录生成的cDNA也习惯上也称为“基因”，但不含有基因转录的调控序列，只含翻译调控和多肽链编码序列。 例如： 大肠杆菌通常只有5%的基因高表达，其余不表达或低表达。 平时与细菌蛋白质生物合成有关的延长因子编码基因表达活跃，而与DNA损伤修复有关的酶分子编码基因很少表达； 当紫外线照射引起DNA损伤时，修复酶编码基因表达活跃。 说明基因表达是在一定调控机制下进行。生物体随时调整不同基因的表达状态，适应环境，维持生长。 2.阻遏：如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可阻遏基因。可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏(repression)。如：当细菌培养基中色氨酸供应充足时，细菌体内与色氨酸合成有关的酶编码基因表达被抑制。 本节学习主要知识点： 基因表达调控最重要的环节是转录起始水平的调控； 反式作用因子与顺式作用元件的概念； 基因转录激活调节的基本要素；特异DNA序列的概念；操纵子的组成；启动序列和操纵序列的作用。 1.原核生物的基因表达调控 启动序列 操纵序列 两个以上编码序列 其他调节序列 顺式作用元件的特点及种类 不同基因具有各自不同的顺式作用元件； 在不同真核生物的顺式作用元件中也常发现一些共有序列 ，如TATA盒、CAAT盒等； 这些共有序列就是顺式作用元件的核心序列，是RNA聚合酶或特异转录因子的结合位点。 顺式作用元件根据在基因中的位置、激活作用性质及作用方式分为启动子、增强子和沉默子等。 1. DNA -蛋白质相互作用： 是指反式作用因子与顺式作用元件之间的特异识别及结合。 通常是非共价结合，被识别的DNA结合位点通常呈对称、或不完全对称结构。 当调节蛋白进入DNA大沟或小沟时，通过调节蛋白的某些氨基酸残基侧链与DNA中的某些碱基相互联系，形成DNA-蛋白质复合物。 2.蛋白质-蛋白质相互作用： 绝大多数调节蛋白质结合DNA前，先通过蛋白质-蛋白质相互作用，形成二聚体(dimer)或多聚体(polymer)。 最常见的是二聚体，是由两个蛋白质分子单体通过一定结构域结合而成。 与DNA结合的能力异二聚体强于同二聚体。 由于调节蛋白的结构不同，有时形成二聚体后会丧失结合DNA的能力。 也有一些蛋白质，不是通过二聚化或多聚化，而是通过蛋白质-蛋白质相互作用间接结合DNA，调节基因转录。 (四）RNA聚合酶活性的调节 启动序列或启动子是由转录起始点、RNA聚合酶结合位点及转录调节组件构成。 启动序列或启动子的核苷酸序列会影响其与RNA聚合酶的亲和力，影响转录起始。 如：E.coli的有些基因每秒转录一次，而有些基因的转录在一代细胞中可能还不到一次。这种差异就是因为启动序列不同所致。 第 三 节  原核基因表达调节 本节学习主要知识点： 原核生物绝大多数功能相关的基因成簇串连在一起，共同组成一个转录单位——操纵子。如乳糖操纵子，色氨酸操纵子等。 在原核基因的调控中普遍存在操纵子机制。 在一个操纵子中，只有一个启动序列，同时有多个可转录的编码基因，都受同一启动序列调控，产生协调表达，转录出多顺反子mRNA。 （三）原核操纵子受到阻遏蛋白的负性调节 在原核操纵子调控机制中，特异阻遏蛋白是调控启动序列的重要因素。 当阻遏蛋白与操纵序列结合时，特异基因受阻遏而关闭； 当阻遏蛋白脱离启动序列时，特异基因去阻遏而开放表达。 葡萄糖对乳糖操纵子的阻遏作用 单纯有乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源； 有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。 原因：葡萄糖存在时，葡萄糖通过降低cAMP浓度，阻碍cAMP与CAP结合，抑制乳糖操纵子转录，不能生成β-半乳糖苷酶，细菌不能利用乳糖，只能利用葡萄糖。 葡萄糖对乳糖操纵子的阻遏作用称为分解代谢阻遏。 （二）反义RNA结合mRNA翻译起始部位