动物遗传育种实验技术(指导教材).docVIP

动物遗传育种实验技术 实验一 预备实验 实验二 基因组DNA提取 实验三 核酸纯度、浓度与分子量测定 实验四 PCR及RT-PCR 实验五 DNA片段的回收和纯化 实验六 DNA片段与载体的连接及转化 实验七 质粒DNA提取 实验一 预备实验 1. 主要仪器设备 1.1 高速冷冻离心机 1.2 PCR扩增仪 1.3 DNA/RNA浓度测定仪 1.4 电泳系统 1.5 计算机成像系统 1.6 多功能恒温箱 1.7 超净工作台、摇床、紫外透射仪等 2. 工具酶及试剂盒 2.1 限制性内切酶 2.2 PCR扩增试剂盒 2.3 DNA片段回收纯化试剂盒 2.4 质粒提取及纯化试剂盒 3. 主要药品及试剂 3.1 琼脂糖、蛋白酶K、十二烷基硫酸钠（SDS）、SET 3.2 三羟甲基氨基甲烷（Tris） 3.5 LB培养基、氨苄等 3.6 DL2000 Marker、6×loading buffer 4. 主要试剂和溶液的配制 4.1 1M Tris·Cl (1L：800ml H2O中加121.1g Tris, 用浓HCl调pH 至8.5后定溶至1升，灭菌) 4.2 0.5M EDTA pH8.0 (1L: 800ml H2O中加186.1g 二水（EDTANa2·2H2O），用NaOH调 pH至8.0，定溶至 1 升) 实验二 基