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- 2017-10-08 发布于天津
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实验目的学习DNA纯化的原理和方法;掌握利用试剂盒从凝胶中回收.ppt
L/O/G/O 实验目的 实验原理 实验仪器、材料、试剂 实验步骤 1 2 3 4 注意事项 思考题 5 6 实 验 目 的 学习DNA纯化的原理和方法; 掌握利用试剂盒从凝胶中回收 DNA的方法。 实 验 原 理 DNA的纯化:去除影响DNA连接酶活性的物质以及其它的DNA片段, 回收得到纯的目的DNA片段。 DNA片段的凝胶回收根据回收片段大小不同可采用不同方法: 常规片断级(DNA片段为100bp-10kb):主流方法是柱回收试剂盒 大片段级(DNA片段7kb):可选方法是玻璃奶/纯化填料胶回收试剂盒,电洗脱法 小片段级(DNA片段100bp):柱回收试剂盒 实 验 原 理 试剂盒可以直接从PCR产物中或琼脂糖凝胶中回收DNA片段,有效地加快了DNA的纯化速度。 实 验 原 理 试剂盒主要含有: 柱式离心管 Binding Buffer Wash solution Elution Buffer 实 验 原 理 柱式离心管:含有一小片滤膜,通常是DEAE纤维素膜,是一种吸附阴离子基团的阴离子交换纤维素,它能够结合带有负电荷的DNA分子。 实 验 原 理 Binding Buffer:溶解琼脂糖凝胶块, 释放DNA。 Was
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