第五单元 基因工程操作1.pptVIP

【自主学习】独立阅读课本，找到下列问题的答案（即关键词），小组合作整理出准确答案 一、目的基因的获取： 1．目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 。 2．获取目的基因的方法 (1)从基因文库中获取目的基因 ①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导入受体菌的群体中 ，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 基因组文库：含有一种生物的 基因 ②种类 cDNA文库：含有一种生物的 基因 ③目的基因的获取 根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。 2．获取目的基因的方法 (2)利用PCR技术扩增目的基因。 ①PCR：是一项在生物体外 特定DNA片段的核酸合成技术。 可以获得 的目的基因 ②条件：已知目的基因的 序列。 ③过程：目的基因DNA受热形成 ，与 结合， 然后在_________的作用下进行延伸形成DNA。 ④方式：指数扩增=2n(n为扩增循环的次数) 2．获取目的基因的方法 (3)人工合成法： 基因 ， 已知，可以人工合成。 二、基因表达载体的构建 1．表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 给下一代；同时使目的基因_________________和发挥作用。 2．启动子：位于基因的 ，它是 和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。 3．终止子：位于基因的 ，终止 。 4．标记基因： 受体细胞是否含有目的基因。 【小组合作】根据任务提示，在自己笔记本上作答，然后小组合作讨论，得出一致意见 任务（一） 获取目的基因的方法及适应条件 任务（二） PCR技术与细胞内DNA复制的区别 任务（三）讨论基因表达载体的构建 1．基因表达载体的组成有哪些？请画出基因表达载体的模式图 2.为什么要构建基因表达载体？ 3.如何构建基因表达载体？ 【合作训练】各自得出自己的答案，小组讨论解答 1 下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( ) ①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．②③ 2、不属于目的基因与运载体结合过程的A．用一定的限制酶切割质粒，露出黏性末端 B．用同种限制酶切割目的基因，露出黏性末端 C．将切下的目的基因插入到质粒的切口处 D．将重组DNA引入到受体细胞中进行扩增 3．哪项不是基因表达载体的组成部分 ( ) A．启动子 B．终止密码 C．标记基因 D．目的基因 4．在胰岛素的基因与质粒形成重组DNA分子的过程中，下列哪组是所需要的( ) ①同一种限制酶切割两者； ②不需同一种限制酶切割两者； ③加入适量的DNA连接酶； ④不需加DNA连接酶 A．①③ B．①④ C．②④ D．②③ 自主学习 稳定 表达 双子叶 单子叶 T-DNA Ti质粒的T-DNA 基因枪 花粉管通道 显微 提纯 雌 输卵管或子宫 繁殖快 单 较少 用钙离子 感受态 感受态 转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因 DNA分子 目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术 目的基因是否翻译成蛋白质 蛋白质 抗体 抗原-抗体 个体生物学水平 有抗虫 【小组合作】根据任务提示，先独立在学案上作答，然后小组合作讨论，得出一致意见 任务（一） 关于将目的基因导入受体细胞 1、哪些细胞可以做受体细胞？说出目的基因导入这些细胞常用的方法 2、动植物受精卵和体细胞都可以作受体细胞吗？ 任务（二） 若已经完成了基因工程的操作，但没有得到所需要的基因产物和相应的性状，可能的原因是什么？该如何鉴定你的推测？ 原因 鉴定方法 探针 待测物质 【即时应用】 1． （1）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上 （2）农杆菌转化法 含重组Ti质粒的农杆菌 （3）目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上 DNA分子杂交技术 将棉株细胞中的基因组提取出来，与探针（用放射性同位素标记的含有目的基因的DNA片段）杂交，如果出现杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中 【即时应用】 2． （1）从基因文库中获取 化学合成（人工合成）