基因及分子生物学考试+位景香.docVIP

第一讲　染色体 染色质与染色体的基本概念 染色体（chromosome）是细胞在有丝分裂时遗传物质存在的特定形式，是间期细胞染色质结构紧密包装的结果。 真核生物的染色体在细胞生活周期的大部分时间里都是以染色质(chromatin)的形式存在的。 染色质是一种纤维状结构，叫做染色质丝，它是由最基本的单位—核小体(nucleosome)成串排列而成的。 1.DNA 包装成染色（质）体的重要性 (1)压缩以适应细胞的微小空间(2)保护 DNA(3)便于DNA复制与分离(4)便于调控基因表达和实现基因重组 2.染色体的复制与分离 染色体DNA关键序列:(1)自主复制序列（autonomously replicating sequence，ARS）：与染色体DNA复制有关(2)着丝粒序列（centromere DNA sequence，CEN）：与染色体复制后平均分配到子代细胞中有关(3)端粒DNA序列（telomere DNA sequence，TEL）：与染色体的稳定性有关 端粒（telomere）:染色体末端的特化结构，由端粒DNA和端粒蛋白质构成。 核小体 核小体与组蛋白的结构 核小体的组装 （1）DNA首先结合H3.H4四聚体（2）与2个H2A.H2B二聚体结合形成核小体 （3)H1最后加入 三、　DNA的修复、重组与转座 DNA突变与修复 问题（1.）DNA如何足够快速修复以防止错误成为突变存在于遗传物质中 复制子中的3‘——5’外切酶元件可将错误掺入的核苷酸去除 （2.）在修复过程中如何区分母链与子链？ MutH对切割位点和DNA链的选择1. 切割5′-GATC-3′的5′ 2. 切割5′-GATC-3′中A未甲基化的DNA链 （3）当DNA断裂或严重损伤致使原有序列不能被读取时，细胞如何修复正确的DNA序列？ （4）细胞如何应对阻碍复制的损伤？ 1. 错配修复将逃脱校正读码的错误去除①MutS识别并结合到错配碱基处 ②MutS和错配的DNA共同募集MutL和MutH ③MutL激活MutH，MutH在错配碱基附近切断一条链 ④UvrD解旋酶从切口向错配碱基方向解开DNA双链 ⑤核酸外切酶VIII或RecJ，或核酸外切酶I去除含有错配碱基的DNA片段 ⑥由DNA聚合酶III填补空缺并由DNA连接酶结合 2 .DNA dmage Introduction of DNA mutation and repair 类型 损伤 酶 错配修复 复制错误 E.coli中MutS、MutL和MutH 人类中MSH、MLH和PMS 光激活作用 嘧啶二聚体 DNA光解酶 碱基切除修复 受损的碱基 DNA糖基化酶 核苷酸切除修复 嘧啶二聚体 E.coli中UurA、B、C、D,人类 碱基上的大加合物 XPC/A/D、ERCCI-XPF以及XPG 双链断裂修复 双链断裂 E.coli中RecA和RecBCD 移损DNA合成 嘧啶二聚体或脱嘌呤位点 Y家族DNA聚合酶，如E.coli的UmuC 3.切除修复 (excision repair) 3.1碱基切除修复（base excision repair） ①DNA糖基化酶识别错误碱基并将其除去，形成脱氧戊糖 ②AP核酸内切酶切除脱碱基戊糖 ③DNA聚合酶I以未受损的DNA链为模板合成新链，DNA连接酶连接新链 3.2核苷酸切除修复（nucleotide excision repair） ①UvrA-UvrB识别并结合损伤碱基所产生的扭曲位点，且UvrA脱离 ②UvrB使损伤碱基附近DNA变性，产生单链凸起 ③UvrB募集UvrC，UvrC在错误碱基两侧切开DNA ④UvrD除去被切割的DNA片段，PolⅠ和连接酶修补缺口 4．转录偶联的DNA修复：a。RNA聚合酶在损伤上游正常转录DNA。（P279）b。遇到1损伤时，RNA聚合酶受阻，转录停止c.RNA聚合酶招募核苷酸切除修复蛋白到损伤部位， 修复蛋白能触及损伤 5. 同源重组机制的Holliday模型①两个同源DNA排列整齐②DNA断裂，产生单链