白茶提取物抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究.docVIP

目 录 摘要 1 Abstract 1 1 引言 2 1.1 病毒性乙型肝炎的治疗药物研究进展 2 1.1.1核苷及核苷类似物 3 1.1.2细胞因子类 3 1.1.3中药 3 1.2茶抗病毒功效及增强机体免疫力研究进展 4 1.2.1茶多酚抗乙型肝炎病毒及提高机体免疫力作用 4 1.2.2茶方治疗病毒性肝炎高胆红素血症 5 1.2.3茶多糖对机体免疫力功能的影响 5 1.2.4茶生物碱对机体免疫力功能的影响 5 1.2.5茶氨酸对机体免疫功能的影响 6 1.3乙肝病毒模型的研究进展 6 1.3.1灵长类乙肝动物模型 6 1.3.2鼠类乙肝动物模型 6 1.3.3禽类乙肝动物模型 7 1.3.4体外动物细胞株模型 7 1.4实时荧光定量PCR技术在临床上的应用研究 7 1.4.1实时荧光定量PCR技术的基本原理 7 1.4.2实时荧光定量PCR技术在临床中的应用 8 1.5本试验的立论依据及意义 9 2 材料与方法 10 2.1 材料 10 2.1.1实验动物 10 2.1.2药品 10 2.1.3主要试剂 10 2.1.4引物及探针 10 2.1.5主要仪器 11 2.2 方法 11 2.2.1荧光定量PCR反应体系的建立及优化 11 2.2.2动物造模与动物分组 12 2.2.3药物干预 13 2.2.4荧光定量PCR检测各血清中DHBV DNA的数量 13 2.2.5鸭IFN-γ检测 14 2.2.6数据处理 15 3 结果与分析 16 3.1 DHBV DNA阳性标准品的FQ-PCR的标准曲线 16 3.2荧光定量PCR体系优化的正交实验结果 16 3.3 WTE用药前后麻鸭血清中DHBV DNA水平比较 17 3.4各组用药后对血清中DHBV DNA的抑制率 19 3.5 WTE对鸭血清中IFN-γ表达的影响 19 4讨论 22 4.1白茶提取物(WTE)的抗病毒性乙型肝炎（DHBV）作用 22 4.2白茶提取物(WTE)的提高鸭IFN-γ含量分泌作用 22 4.3白茶提取物(WTE)增强机体免疫力及抗病毒的作用机理初探 22 参考文献 24 附 录 26 致 谢 27 白茶提取物抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究 *** 摘要γ-干扰素（IFN-γ）的浓度变化。结果表明，WTE对DHBV的抑制率最高可达73.7%（拉米夫定对照组最高抑制率为88.9%），在一定范围内给药剂量越大抑制率越高，且其停药后反弹效果较拉米夫定不明显。ELISA检测发现，WTE处理组鸭体内的IFN-γ含量相对于空白对照组显著上升（P0.01），说明其可能通过促进机体内的干扰素分泌来抑制肝炎病毒。 关键词白茶提取物 鸭乙型肝炎病毒 干扰素 DHBVDNA 荧光定量PCRof white tea extract *** Abstract: White tea , as one of six tea, retains a large number of polyphenols, theanine, caffeine and other nutrients compared to other teas because of its unique processing procedures. White tea has bactericidal, anti-inflammatory, anti-virus anti-oxidation and anti-mutation effect. This study set an infected animal model of Fuzhou DHBV, drew venous blood before and after different drug effects to measure the DHBV DNA serum by the real-time quantitative PCR method, and detected the dynamic changes of the duck’s IFN-γ by ELISA assay. The results show that the highest inhibition ratio by WTE reached 73.7%, while the highest inhibition ratio by lamivudine group reached to 88.9%, and its inhibitory effects were dose-dependent and time-dependent. In addition, virus replication didn’t rebound evidently,while lamivudin