农杆菌介导的水稻遗传转化与植株再生-华北农学报.pdf

华北农学报 ·2 0 0 5 , 2 0 ( 1) : 8 1 1 农杆菌介导的水稻遗传转化与植株再生 1 1 1 ,2 1 ,2 王玉珍 ,罗景兰 ,徐 　进 ,刘香玲 ( 1. 中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心 ,河北 石家庄 　05002 1 ;2 . 中国科学院研究生院 ,北京 　100039) 　　摘要 : 以水稻品种 ZH11 和 RBQ 为材料 ,通过水稻成熟胚盾片诱导有效愈伤组织及农杆菌介导的遗传转化技术 , 获得水稻转基因植株 ,为水稻转基因体系的建立和完善奠定基础 。结果表明:N MB 培养基适合水稻成熟胚盾片愈伤 组织诱导 ,M S 培养基适合愈伤分化 ;500 mg/ L 谷氨酰胺或精氨酸有利于愈伤组织的形成 ;培养条件 :愈伤组织诱导 时温度 25～28 ℃,暗培养 ,p H 5 . 8 ;分化时温度 25～28 ℃,光照 1 500～2 000 lx ,12～14 h/ d ,p H 5 . 8 ;6BA 对继代过 程中愈伤组织的生长有促进作用 ;潮霉素筛选的最佳浓度为 50 mg/ L 。 关键词 :水稻 ;成熟种子 ;组织培养 ;有机营养物 ;遗传转化 ( ) 中图分类号 :S5 11. 0 1 　　文献标识码 :A 　　文章编号 :1000 - 709 1 2005 02 - 0008 - 04 Genetic Transf ormation Mediated by Agrobacterium and Plantlet Regeneration of Rice WAN G Yuzhen ,L U O J inglan ,XU J in ,L IU Xiangling ( 1. Center for Agricult ure Source , CA S , Shij iazhuang 　05002 1 ,China ; 2 . Graduate School of t he Chinese Academy of Sciences ,Beij ing 　100039 ,China) Abstract :Cult uring mat ure rice ( ZH11 ,RBQ) i n v it ro , t he key techniques including explant s disinfection , basic medium , organic nut rient s , et al . and genetic t ransformation mediated by agrobacterium were st udied . The result s showed as following : N MB was suit able for t he callus induction , and M S for differentiation . 500 mg/ L of Glu or Arg redounded to t he callus induction . All t he cult ures were kept under dark , 25 - 28 ℃, p H 58 for callus induction ; and 25 - 28 ℃, 1 500 - 2 000 lx ,12 - 14 h/ d ,p H 58 for differentiation . 6BA show s a significant result on t he growt h of callus ; The optimal concent ration of hy