人胃癌细胞bgc-823顺铀耐受后hmsh2蛋白-大连医科大学学报.pdfVIP

第 27 卷第 1 期 大连医科大学学报 Vol.27 No.1 2005 年2 月 Journal of Dalian Medi创University Feb.2005 人胃癌细胞 BGC - 823 顺铀耐受后 hMSH2 蛋白表达下降 赵宝霞1 气于志红3 范凯闰平4 张朝吕中1 ， 3 (1.大连医科大学病理学教研室，辽宁大连 116027;2. 大连医科大学检验医学院，辽宁大连 116027;3. 大连医科大学第二临 床学院分子生物学实验室，辽宁大连 116027;4. 大连医科大学分析测试中心，辽宁大连 116027) 摘要: [目的]初步探讨耐药性产生与错配修复蛋白 hMSH2 表达的关系，以证明其功能丧失是肿瘤 细胞产生耐药性的机制之一。[方法J 1.逐步递增顺铀浓度、间歇作用体外诱导法，诱导人胃癌细 胞株BGC - 823 产生顺铀耐受性;2.MTT 法检测耐药指数并用免疫细胞化学法检测耐受前后肿瘤 细胞表达耐药相关蛋白 LRP， GST-π 的差异;3. 免疫细胞化学法检测耐受前后肿瘤细胞表达 hMSH2 蛋白的差异。[结果]与 BGC - 823 相比，经耐药诱导所产生的 BGC - 823/cDDP 细胞出现 了对顺铀的耐受，耐药指数为 3.93; 且 LRP 和 GST -π 蛋白表达增强(P0.0I)， hMSH2 蛋白的 表达明显减弱(PO.oI) o [ 结论]错配修复基因 hMSH2 蛋白功能降低导致的肿瘤细胞基因不稳 定性可能是肿瘤细胞耐药性产生的原因之一。 关键词:胃癌;顺铀;hMSH2;耐受性 中固分类号:R730.2 文献标识码:A 文章编号: 1671 -7295(2005)01- 0005 - 04 丧失是肿瘤细胞产生耐药性的机制之一。 胃癌是常见的恶性肿瘤，手术辅以化疗是治疗 胃癌的主要方法，但效果常难以令人满意。导致治 1 材料和方法 疗失败的一个重要原因是肿瘤细胞能产生对化疗药 物的耐受性。在耐药性产生过程中肿瘤细胞常分别 1. 1 研究对象 人低分化胃腺癌细胞株 BGC - 823 ，购自上海 有 P- gp、 LRP， ToPo、 GST -π 等多种耐药蛋白的 细胞生物所。 产生和表达，这提示我们肿瘤细胞耐药性的产生涉 1.2 主要试剂及仪器 及细胞内多种基因表达的不稳定。而这种不稳定性 的产生可能与细胞突变有关。错配修复系统(mis- RPMI - 1640 培养基，美国 Invitrogen 公司;小 match repair system , MMR) 能检出并修复在 DNA 牛血清，中国医学科学院天津血液研究所;膜蛋白 复制中错配的碱基，避免遗传物质突变积累[IJ 。在 酶，上海生工药业有限公司;哇哇蓝(MTT) ，美国 Sigma 公司;二甲基亚枫(DMSO) 中国西安化学试 消化道肿瘤中常有 MMR 基因突变，它的突变所致 剂厂;顺铀(Cisplatin ， cDDP) 齐鲁制药厂;鼠抗人 的 MMR表达降低以至产生基因表达的不稳定性是 hMSH2 单克隆抗体，美国 CALBIOCHEM 公司;鼠 否是肿瘤细胞耐药性产生的原因之一呢?本研究用 顺铀