一个白菜花粉发育相关的新基因BcMF7的鉴定.pdfVIP

中国科学C辑：生命科学 2007年第37卷第4期：479～487 中国科学杂志社 SCIENCEPRESS http：／／www．scichina．com INCHINA 一个白菜花粉发育相关的新基因BcMF7的鉴定 黄鹂 曹家树8张豫超叶意群 (浙江大学蔬菜研究所，杭州310029) 摘要 利用cDNA．AFLP技术分析了白菜(BrassicacampestrisL．ssp．chinensisMakino，syn．B． meiotic rapaL．ssp．chinensis)雄配子减数分裂的胞质分裂突变体(malecytokinesis，mmc)和野生型 植株花蕾基因表达的差异，克隆了其中一个在野生型花蕾中特异表达的基因BcMF7，序列分析 发现该基因的最大开放阅读框为390 kD， bp，编码129个氨基酸，推测的蛋白质分子量为13．75 含有8个蛋白激酶C磷酸化位点，2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点，2个酪氨酸激酶磷酸化位点， 2个N一糖基化位点以及2个N一豆蔻酰化位点等，这些位点均与细胞内信号传导、蛋白定位 以及黏附等过程有关．时空表达特点分析发现BcMF7在花粉中特异表达，其转录本最早在花 粉发育的四分体时期开始出现，在单核小孢子时期表达丰度达到最高，随后在成熟花粉粒形成 时期表达量又有所下降．推测BcMF7可能在花粉发育的四分体时期到成熟花粉粒形成过程的信 号传导中发挥重要作用． 关键词 白菜(Brassica 基因表达生物信息学信号传导 campestris)花粉发育 花粉发育受复杂的基因表达网络调控，众多基 MMC为单基因突变．以上这些结果说明MMC突变 因参与其中，其中任何一个关键基因的突变都可能 仅影响雄性生殖器官而没有影响其他花器官组织的 导致这个网络中其他基因的表达变化．早期人们通 发育．因此，利用mmc突变体花蕾和野生型花蕾为材 过分离鉴定突变体及其对应基因的研究，已在不同 料进行花粉发育相关基因的分离，在比较二者的转 的物种中鉴定了150多个影响花粉发育关键步骤的突 录组差异时发现，MMC基因突变引起了其下游众多 变体和基因，包括在花粉中特异表达的30多个基 基因的表达变化，其中许多基因为花粉特异基因， 因【l】．但关于这些基因之间的互作机制仍知之甚微． 在我们的前期研究中，鉴定了一个白菜(Brassica BcMF4等【2面1，本文中。我们利用类似的方法分离、 L． campestrisL．ssp．chinensisMakino，syn．B．rapa 克隆了一个在白菜花粉中特异表达的新基因 ssp．chinensis)雄配子减数分裂的胞质分裂突变体 (malemeiotic cytokinesis，mmc)，发现MMC基因在花 达模式分析表明BcMF7可能是四分体形成到花粉粒 粉发育中发挥重要的作用．mmc突变体不能形成正常 成熟过程中的一个重要的信号分子． 的花粉，和野生型植株黄色饱满的花药相比，其花药 发白萎缩，花丝短小，但其他花器官如萼片、花瓣和 1材料与方法 雌蕊均与野生型没有差别，雌性功能正常．进一步研 1．1材料 、 究发现，突变导致了雄性减数分裂的