不同倍性扁穗牛鞭草小孢子发生及雄配子体发育的研究.pdfVIP

第36卷第6期 中 国草地学报 2014年11月 V01．36No．6 Chinese ofGrassland Nov．2014 Journal 文章编号：1673—50Zl(2014)06—0053一07 不同倍性扁穗牛鞭草小孢子发生 及雄配子体发育的研究 睢艺芳，郭丽娟，杨春华+，刘 琳，陈灵鸷，陈 菲 (四川农业大学动物科技学院草业科学系，四川 雅安625014) 摘要：采用常规石蜡切片法，探究不同倍性的扁穗牛鞭草小孢子发生、雄配子体的发育以及花粉萌发情况。结 果表明：四倍体材料花粉母细胞减数分裂过程基本正常，异常细胞率为3．41％，六倍体异常率较高(22．58％)，异常 表现主要是减数分裂Ⅱ后期胞质分裂不同步；四倍体材料绒毡层发育正常，六倍体绒毡层在雄配子发育过程中解体 较多，占15％左右；六倍体花粉在柱头上萌发，花粉管盘绕不伸入柱头或伸入柱头后中途停止生长，未观察到精细胞 释放，四倍体材料花粉可成功伸人子房并释放精细胞。 关键词：扁穗牛鞭草；四倍体；六倍体；小孢子发生；雄配子体发育 中图分类号：Q944．4；S543文献标识码：A 扁穗牛鞭草[HP，7z以以矗r如fo脚痧糟ss口(L．f．)2009～2011年每年7月中下旬至8月下旬，于 R．Br．]是禾本科牛鞭草属多年生根茎型草本C。植扁穗牛鞭草抽穗期采集不同倍性不同发育时期材料 物，主要分布在热带、亚热带地区。作为典型的暖季 未开花花序各50份。取中上部小花用FAA固定 型禾草，扁穗牛鞭草具有强大的克隆繁殖能力，但有 性生殖能力弱，野生或人工栽培条件下结实率很 定，爱氏(Ehrlich’s)苏木精整体染色法染色(苏木 低[1~3]，这就限制了扁穗牛鞭草的进一步推广应用。 对此，国内外学者从不同角度进行了大量研究“~9]。 铝钾59、蒸馏水50rnl)，常规石蜡切片法制片n“。 傅鲜桃等[10]研究发现，‘广益’扁穗牛鞭草已萌发1．2．2 花粉母细胞减数分裂过程观察 的花粉管尖端分叉、盘绕在柱头表面及尖端膨大等 于孕穗期收集供试材料花序各1。。枚，卡诺固 异常现象对自交亲和性有很大影响；陈灵鸷等[1u认 定液(无水乙醇：冰乙酸体积比3：1)固定2h后经 为，温度、湿度等外界因子对扃穗牛鞭草柱头可授性 过95％、80％、70％乙醇处理，转入苏木精染液中整 影响较大；此外，研究表明花粉散布特性与专性远交 体染色2～3d。染色后在解剖镜下剥离小花外稃， 繁育系统之间的矛盾也会影响扁穗牛鞭草结实 手术刀横切花药释放内容物，镊子取走多余杂质后 率[I引。但关于限制扁穗牛鞭草结实率的生殖生物 盖上盖玻片，于Leica2000显微镜100倍视野下观 学因素的研究较少，本研究以不同倍性扁穗牛鞭草 察扁穗牛鞭草花粉母细胞减数分裂过程。 为研究对象，采用常规石蜡切片法和光学显微技术 1．2．3花粉萌发及花粉管生长观察 对小孢子发生与雄配子发育进行研究，利用常规压 采用棉蓝一乳酸一酚染色法J胡(苯胺蓝19溶于下 片法对小孢子母细胞减数分裂过程进行观察，以期 列配比的乳酸苯酚混合液中：乳酸25ml、苯酚 为扁穗牛鞭草的生殖生物学研究提供基本资料，也 为探求扁穗牛鞭草天然种群结实率低的胚胎学因素 提供科学依据。 花粉在柱头上的萌发生长情况进行观察(室温27℃ 1材料与方法 条件下)。 1．1试验材料 供试材料种植于四川农业大学草学基地，分别 *通讯作者，E—mail：ychh@sicau．edu．cn 收稿日期：2014一05一06；修回日期：2014一07—21 为扁穗牛鞭草四倍体野生材料H052和