移液枪头式固相微萃取-高效液相色谱法测定细胞培养液中的4种生物碱.pdfVIP

2017年 1月 Vol .35 No .1 January 2017 Chinese Journal of Chromatography 14-19 邹 汉 法 研 究 员 纪 念 专 辑 （下 ）•研究论文 DOI : 10.3724/SP.J . 1123.2016.08001 移液枪头式固相微萃取-高效液相色谱法 测定细胞培养液中的4 种生物碱 王 娜 妮 \ 寿 旦 U2 ， 王 绪 平 \ 朱 岩 2* * (1.浙江省中医药研究院中药研究中心，浙江杭州310007; 2.浙江大学化学系，浙江杭州310007) 摘要:建立了移液枪头式固相微萃取（SPME)-高效液相色谱检测细胞培养液中4 种生物碱（黄柏碱、药根碱、巴马 丁和小檗碱）的分析方法。以甲基丙烯酸为反应单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂、偶氮二异丁腈为引发剂， 在移液枪头内进行原位聚合反应，制备含有弱阳离子交换整体固定相的SPME枪头。样品经 SPME净化后，用高 效液相色谱-紫外检测法进行分析，流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液(0. 05 mol/L， pH 4)，紫外检测波长为270 nm ， 外标法定量。4 种生物碱的检出限(S/况=3)为 0. 16-0.39 pg/L ;以空白细胞培养液进行加标回收率试验，加标回 收率为92.73%~97.91%，相对标准偏差（RSD)为 0. 14%~3.31%。该方法简单、灵敏、准确，能够用于细胞培养液 中微量生物碱的分析研究。 关键词:高效液相色谱;固相微萃取;整体柱;生物碱;黄柏 中图分类号:〇658 文献标识码:A 文章编号：1000-8713( 2017) 01-0014-06 Determination of four alkaloids in cell culture fluids by pipette tip solid phase microextraction-high performance liquid chromatography WANG Nani1， SHOU Dan 12, WANG Xuping1， ZHU Yan2* ( 1. D epartm ent o f M ed icin e ，Zhejiang A cadem y o f Traditional C hinese M ed icin e ，H angzhou 310007, C h in a ； 2. D epartm ent o f C h e m istry ，Zhejiang U n iv e rsity ，H angzhou 310007, C hina) Abstract ： A method for the determination of four alkaloids (phellodendrine ，jatrorrhizine ，pal - matine ，berberine ) in cell culture fluids was developed by pipette tip solid phase microextrac ­ tion (SPME) and high performance liquid chromatography (HPLC ). A weak cation exchange monolithic stationary phase was prepared by in-situ polymeri