HPLC法在国内外药典中的应用与比较.ppt

山东省药品检验所 HPLC法在国内外药典中的应用与比较 山东省药品检验所化学药品科 王小兵 汇报的主要内容 一、简述 二、高效液相色谱仪 三、系统适用性 四、色谱条件的调整 五、HPLC的应用及方法开发 一、简述 《中国药典》2010年版二部共收载2271个品种，新增品种330个，修订品种1500个，涉及HPLC检测项目的品种有1291个，占总品种的57%，其中新增/修订926个。 HPLC法在整个药典品种的检验中占有重要地位。 一、简述 High Performance Liquid Chromatography简称HPLC，开始应用于20世纪60年代后期，现已趋于成熟，广泛应用于医药、生化、天然产物主要组分分析，以及食品、化妆品分析，环境分析，农业分析，石油化工分析等。 优点：高压+高速+高效+高灵敏度 一、简述 CHP(2010)：《中国药典》2010年版 USP：United Stated Pharmacopoeia EP：European Pharmacopoeia JP：Japanese Pharmacopoeia 定义 CHP(2010)附录V D：HPLC系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。 USP(32)621：High-pressure liquid chromatography (HPLC), sometimes called high-performance liquid chromatography, is a separation technique based on a solid stationary phase and a liquid mobile phase. Separations are achieved by partition, adsorption, or ion-exchange processes, depending upon the type of stationary phase used. 定义 EP(6.0) 2.2.29：Liquid chromatography is a method of chromatographic separation based on the difference in the distribution of species between two non-miscible phases, in which percolates through a stationary phase contained in a column. 定义 JP(XV)2.01：Liquid chromatography is a method to develop a mixture injected into a column prepared with a suitable stationary phase by passing a liquid as a mobile phase through the column, in order to separate the mixture into its components by making use of the difference of retention capacity against the stationary phase, and to determine the components. 二、高效液相色谱仪 基本组成： 泵 进样器 色谱柱—分离的核心 CHP(2010)附录： 1.正相：硅胶柱； 反相： C-18柱、C-8柱； 2.粒径：普通3～10μm； 2μm（亚-2μm仅能用于UPLC）； 3.温度要求：以硅胶为载体的通常 40℃；不宜超过60 ℃； 4.pH要求：2～8； 色谱柱 色谱柱技术发展很快，新填料新技术也不断涌现，给我们提供了更多的选择。 Gemini-NX C18柱： 色谱柱 Zorbax StableBond柱： 采用了较大的二异丁基(SB-C18)或二异丙基(SB-C8、SB-C3、SB-Phenyl、SB-CN、SB-Aq)侧链基团和空间位阻，避免了在低pH条件下的水解破坏，其pH1.0~8.0，温度上限也可达到80~90℃，甚至在100%水相中也有出色的表现。 色谱柱 Zorbax Extend C18柱： 采用独特的双配位C18-C18键合技术，使的在高pH条件下使用硅胶基色谱柱成为可能，在pH2~11.5的范围内是稳定的。 USP(32)621: Stationary phases for modern, reverse-phase liquid chromatography