热带假丝酵母木糖乙醇发酵相关基因的筛选与分析.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，３２（１１）：６１６９ 热带假丝酵母木糖乙醇发酵相关基因的筛选与分析 １，２，３ １，２ １，２ １，３ ３ １，３ 徐　勇 　沈　罛 　邱兴天 　蔡　鹏 　黄敏仁 　余世袁 （１南京林业大学化工学院　南京　２１００３７　２江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室　南京　２１００３７） （３教育部林木遗传与生物技术省部共建重点实验室　南京　２１００３７） 摘要　以木糖代谢模式菌株热带假丝酵母为材料，采用抑制性消减杂交技术构建高质量的木糖、 葡萄糖发酵产乙醇的正向、反向ＳＳＨｃＤＮＡ文库。采用ＡＢＩ３７３０系统测定２个文库中的１０１３和 ５２５条ＥＳＴ序列，共拼接注释得到正向、反向文库中５２５个和２８８个差异性表达的已知基因，另有 ６７个和１２个可能的新基因，并对已知基因进行了ＧＯ分类。通过文库间ＢＬＡＳＴ比对去除相似序 列，再结合经典代谢理论的指导筛选出候选基因，以实时定量ＰＣＲ对它们进行了验证和转录本的 定量比较分析，最终筛选出与部分木糖代谢和乙醇发酵相关的主效基因，包括Ｓ