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分子生物学的概念
分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐明蛋白质与蛋白质、蛋白质与核酸之间的互作及其基因表达调控机理的学科。
分子生物学的基本原理:
构成生物体各类有机大分子的单体在不同生物中都是相同的。
生物体内一切有机大分子的建成都遵循一定的规则。
某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性
分子生物学与生物化学之间的关系
分子生物学与生物化学之间的关系密不可分。
分子生物学从分子水平研究生命现象,生物化学研究从分子水平研究生命现象的本质。
分子生物学的研究内容:
DNA重组技术
基因表达调控研究
结构分子生物学
基因组、功能基因组与生物信息学研究
DNA重组技术
目的是将不同DNA片段(如某个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,
一个生物大分子,无论是核酸、蛋白质或多糖,在发挥生物学功能时,必须具备两个前提:
拥有特定的空间结构(三维结构);
发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化
分子生物学研究已经证实,DNA控制了生物的性状遗传。
无论DNA或RNA,都是由许许多多个核苷酸连接而成的生物大分子,而每个核苷酸又由磷酸、核糖和碱基3部分组成
由于亲代能够将自己的遗传物质DNA以染色体的形式传给子代,保持物种的稳定性和连续性。因此,人们普遍认为染色体在遗传上起着主要作用。
染色体包括DNA和蛋白质两部分
染色体在细胞分裂间期表现为染色质。染色体与染色质是同一种物质的两种形态。伸展的染色质形态有利于在它上面的DNA储存的信息的表达,而高度螺旋化了的棒状染色体则有利于细胞分裂中遗传物质的平分
作为遗传物质,染色体具有如下特征:
① 分子结构相对稳定;
② 能够自我复制,使亲子代之间保持连续性;
③ 能够指导蛋白质的合成,从而控制整个生命过程;
④ 能够产生可遗传的变异.
真核生物染色体中DNA相对分子质量一般大大超过原核生物
在真核细胞染色体中,DNA与蛋白质完全融合在一起,其蛋白质与相应DNA的质量之比约为2:1
染色体蛋白主要分为组蛋白和非组蛋白两类
tRNA不仅为每个三联密码子翻译成氨基酸提供了接合体,还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体,它又被称为第二遗传密码
组蛋白是染色体的结构蛋白,其与DNA组成核小体。
根据其凝胶电泳性质可将其分为H1、H2A、H2B、H3及H4
组蛋白含有大量的赖氨酸和精氨酸,其中H3、H4富含精氨酸,H1富含赖氨酸。H2A、H2B介于两者之间。
●组蛋白的特性
进化上极端保守性
无组织特异性
肽链上氨基酸分布的不对称性
组蛋白的修饰作用
富含赖氨酸的组蛋白H5
非 组 蛋 白
染色体上除了存在大约与DNA等量的组蛋白以外,还存在大量的非组蛋白。
非组蛋白的组织专一性和种属专一性
几类常见的非组蛋白
高速泳动蛋白(HMG蛋白
DNA结合蛋白
A24非组蛋白
真核细胞基因组最大的特点是有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开,这就是著名的“C值反常现象
C值:一种生物单倍体基因组DNA的总量
一般情况,真核生物C值是随着生物进化而增加,高等生物的C值一般大于低等生物。
某些两栖类C值大于哺乳动物,而且在两栖类中C值变化也很大,可相差100倍。
由此推断,许多DNA序列不编码蛋白质,是无生理功能的
根据对DNA的动力学研究,真核生物DNA序列大致可分为3类:
不重复序列、中度重复序列、高度重复序列
不重复序列 在单倍体基因组里,这些序列一般只有一个或几个拷贝,它占DNA总量的40%-80%。不重复序列长约750-2000bp,相当于一个结构基因的长度
单拷贝基因通过基因扩增仍可合成大量的蛋白质 。如蚕丝心蛋白基因。
中度重复序列 这类重复序列的重复次数在10-104之间,占总DNA的10%-40%。各种rRNA、tRNA 及组蛋白基因等都属这一类。
高度重复序列--卫星DNA 是另一类高度重复序列,这类重复顺序的重复单位一般由2-10bp组成,成串排列。由于这类序列的碱基组成不同于其他部份,可用等密度梯度离心法将其与主体DNA分开,因而称为卫星DNA或随体DNa.这类DNA只在真核生物中发现
染色质和核小体
由DNA和组蛋白组成的染色质纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构
Beads on a string” structure 证据
染色质DNA的Tm值比自由DNA高,说明在染色质中DNA极可能与蛋白质分子相互作用
在染色质状态下,由DNA聚合酶和RNA聚合酶催化的DNA复制和转录活性大大低于在自由DNA中的反应
DNA酶I(DNaseI)对染色质DNA的消化远远慢于对纯DNA的作用。
用小球菌核酸酶处理染色质以后进行
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