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维普资讯
动 物 学 研 究 2005。Oct.26(5):499—505 CN 53--1040/Q ISSN0254--5853
ZoologicalResearch
表皮生长因子和胰岛素对大熊猫体外培养皮肤
成纤维细胞生物学特性的影响
张 明 ,侯 蓉 ,刘玉 良 ,郑鸿培 ,朱 庆 ,张志和 ,鲜 红
(1.四川农业大学 动物科技学院,四川 雅安 625014;2.成都大熊猫繁育研究基地,四川 成都 610081)
摘要 :用DME:HamsF12(1:1)培养液,添加3个水平的表皮生长因子和2个水平的胰岛素,组合成6种
培养体系 (cs)分别培养大熊猫皮肤成纤维细胞。通过对细胞生长速度和染色体数 目变异率进行测定,测得在
添加 10l/g/mL的胰岛素和40ng/mI的表皮生长因子的培养体系 (cs一5)中:以 (1.673±0.185)XlOS/mL密
度接种细胞,经 3.5d,密度达到6.890XlO5/mL,其生长速度最快;染色体数 目为二倍体细胞的比率 75.77%;
核型分析显示,培养的细胞是大熊猫体细胞。综合衡量 ,cs.5更适合大熊猫皮肤成纤维细胞的培养。
关键词 :大熊猫;成纤维细胞;培养体系;表皮生长因子;胰岛素
中图分类号 :Q952.5 文献标识码 :A 文章编号:0254—5853 (2005)05—0499—07
EffectsofEpidermalGrowthFactorand Insulin on
BiologicalCharacteristicsofGiantPanda (Ailuropoda
melanoleuca)CutaneousFibroblastinVitro
ZHANG Ming ,HOU Rong ,LIUYu—liang ,ZHENG Hong—pei,
ZHU Qing ,ZHANG Zhi—he ,XIAN Hong
r1.CollegeofScience&Techrtolog3ofAnimal,ScihuanAgriculturalUniversit),Yaan 625014,China,
2.GiantPandaBreedingResearchBaseinChengdu,Chengdu 610081,China)
Abstract:Sixculturingsystemsweredesignedbyaddingdifferentconcentrationsofepidermalgrowthfactor (EGF)
andinsulinintoDME/Ham’sF12medium .Basedonthespeedofcellrgowthandvariationratioofchromosomenumber.
wechosethebestculturemediafrom thesixculturesystems.Theresultsshowedthattheculturemedium of10ug/mLin—
sulinand40ng/mLEGFwasmostsuitableforgiantpanda’Scutaneousfibroblastcultureinvitro.Inthebestculturing
system,thedensityoffibroblastincreasedrfom (1.673±0.185)XlO5/mLto6.890X1os/mLofrthreeandahalfdays.
Thefibroblastgrowing speed wasthefastestin allculturesystem and the ratio ofdiploid atthe 5th generation was
75.77% .Karyotypeanal
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