第九课：微生物遗传育种研究进展.docVIP

目 录 1 菌种选育的目的原理 2 1.1 菌种选育改良的具体目标 2 1.2 微生物育种的主要原理 2 2 菌种选育的方法 2 2.1 自然选育 2 2.2 诱变育种 2 2.2.1 物理诱变 3 2.2.1.1 紫外线 3 2.2.1.2 激光 3 2.2.1.3 r射线 3 2.2.1.4 离子束 3 2.2.1.5 中子 3 2.2.1.6 新型诱变剂 3 2.2.2 化学诱变 3 2.2.2.1 移码诱变剂 4 2.2.2.2 碱基类似物 4 2.2.2.3烷化剂 4 2.2.2.4 其他化学诱变剂 4 2.2.3 生物诱变 4 2.2.4 复合诱变 4 2.3 基因重组育种 4 2.3.1 杂交育种 4 2.3.2 原生质体融合育种 4 2.4 基因工程育种 5 2.4.1 基因的定点突变 5 2.4.1.1 单管大引物PCR 5 2.4.1.2 TAMS定点诱变技术 5 2.4.2 易错PCR 6 2.4.3 DNA重排 6 2.4.4 基因组重排 7 2.5 代谢控制育种 7 3 展望 7 参考文献 8 微生物遗传育种的研究 摘要:微生物育种是利用遗传学原理和技术对某种具有特定生产目的的菌株进行改造，以提高产品的产量和质量。本文介绍了微生物遗传育种的发展，包括自然育种、诱变育种、代谢控制育种、基因工程育种等，并对育种技术的发展做了展望。 关键词：微生物育种；诱变育种；基因重组育种；基因工程育种；代谢控制育种 目前,微生物在解决人类的粮食、能源、健康、资源和环境保护等问题中正显露出越来越重要且不可替代的独特作用[l]。据统计，1979年世界工业酶产量为53000吨，1985年酶制剂的总产量为10万吨，作为商品出售的酶制剂有200余种，到1990年总产值约为10亿美。就生物技术而言，1991年美国、德国、法国和英国的总销售额依次为400，200，150，6.4 亿美元[2]。 菌种选育的最终目标，就是通过人工干预，使选出的优良菌种在优化环境中尽可能表现出优异性状。菌种分离、筛选、改良是贯彻微生物发酵始终的工作。微生物育种经历了自然选育、诱变育种、基因重组育种、基因工程育种、代谢控制育种。各个阶段并不孤立存在，而是相互交叉，相互联系。本文就微生物遗传育种的研究进展作一综述。 1菌种选育的目的原理 1.1菌种选育改良的具体目标 (1)提高产物的纯度，减少副产物，提高有效组分；减少色素等杂质。 (2) 提高产量，生产效率和生产效益总是排在一切商业发酵过程首位的目标。 (3)菌种的遗传性状，特别是生产性状稳定。 (4)改变生物合成途径，以获得新产品。 (5)改变菌种性状，改善发酵过程，包括：改变和扩大菌种所利用的原料结构；提高斜面孢子化程度；少用消泡剂或使菌种耐合成消泡剂；改善菌种生长速度；改善菌丝体形状，采用菌球菌丝体发酵；改善对氧的摄取条件，降低需氧量及能耗；耐不良环境：抗噬菌体的侵染，耐高温、耐酸碱、耐自身所积累的代谢产物；改善细胞透性，提高产物的分泌能力等。 1.2微生物育种的主要原理 微生物育种是运用遗传学原理和技术对某种具有特定生产目的的菌株进行改造，去除不良性质，增加有益新性状，以提高产品的产量和质量的一种育种方法。其原理如下： 生物进化过程中微生物形成完善的代谢调节机制 → 不会有代谢产物的积累?→ 解除或突破微生物的代谢调节控制?→ 目的产物积累 → 微生物育种的目的 2 菌种选育的方法 2.1 自然选育 常规育种是以自然突变为基础，从中筛选出具有优良性状菌株的一种育种方法。一般情况下，由于DNA的半保留复制以及校正酶系的校正作用和光修复、切除修复、重组修复、诱导修复等作用，发生自然突变的几率特别低，一般为 10-6~10-10/BP,而且用于工业生产的菌株的性状往往由单一或少数基因控制，所以常规育种时间较长,工作量较大.曾在大肠杆菌(Escherichia Coli)中分离到一系列增变基因，主要有DNDE、MUTD、MUTT、DAM、MUTM、MUTH、MUTI、MUTS等[3]，含有这类增变基因的菌类突变相对较高。自然选育是一种简单易行的选育方法，可以达到纯化菌种，防止菌种退化，提高产量的目的，但发生自然突变的几率特别低。这样低的突变率导致自然选育耗时长，工作量大，影响了育种工作效率，在这种情况下，出现了诱变育种技术[4]。 2.2 诱变育种 诱变育种是以诱变剂诱发微生物基因突变，通过筛选突变体，寻找正向突变菌株的一种诱变方法。诱变剂有物理诱变剂、化学诱变剂和生物诱变剂等。 1927年MILLER发现X-射线能诱发果蝇基因突变。之后人们发现其他一些因素也能诱导基因突变，并逐渐弄清了一些诱变因素的机理，为