遗传学 第12章.ppt

第11章 遗传的分子基础 Molecular Basis of Genetics Guo-Hua Ding Ph.D. guohua_ding@ 第一节 遗传物质是DNA（或RNA） 染色体的化学成分：DNA、蛋白质（组蛋白和非组蛋白）、RNA。 DNA是遗传物质的间接证据 DNA是遗传物质的直接证据 DNA是遗传物质的间接证据 1、DNA通常只在核中的染色体上找到（但线粒体和叶绿体中也存在） 。 2、同一物种的每个细胞核的DNA含量基本相同，而且精子的DNA含量正好是体细胞的一半。 3、同一物种的体细胞核的DNA的质和量都是恒定的。 4、各类生物中，能改变DNA结构的化学物质都可引起突变。 DNA是遗传物质的直接证据 实验： 1、噬菌体的感染 2、烟草花叶病病毒的重建 3、肺炎球菌的转化 1. 噬菌体的感染 背景知识 噬菌体侵染与繁殖基本过程：T2噬菌体浸染大肠杆菌后，遗传物质进入细菌细胞；利用大肠杆菌的遗传复制系统复制噬菌体遗传物质；利用大肠杆菌的遗传信息表达系统合成噬菌体组件；最后组装形成完整的T2噬菌体。 因此只要弄清侵染时进入细菌的是噬菌体的哪一部分，就可能证明哪种物质是遗传信息的载体。 另外：P是DNA的组成部分，但不存在于蛋白质中；S存在于蛋白质中，但DNA中没有。 1. 噬菌体的感染 因为噬菌体由DNA+蛋白质外壳构成，而P只存在于DNA分子，S只存在蛋白质中。Hershey和Chase（1952）设计实验： 第一步：把宿主细菌培养在含有35S（或32P）培养基中，然后用T2噬菌体去感染，结果获得的子代噬菌体被标上35S或32P。 第二步：标记了的噬菌体去感染未标记的细菌，再测定宿主的细胞的同位素标记，结果： 35S标记的噬菌体感染时，宿主细胞内很少有同位素标记。 32P标记的噬菌体感染时，宿主细胞内很多有同位素标记。 2.烟草花叶病毒重建 TMV病毒由RNA+蛋白质外壳构成。 TMV在水和苯酚中震荡，把RNA和蛋白质分开，然后用病毒的RNA和蛋白质分别去感染烟草，结果病毒的蛋白质不能感染烟草。而RNA能感染，但效率较低。 用RNA酶处理RNA后接种烟叶也不能致病，表明RNA可能就是TMV的遗传物质。 重组合试验 综上所述：到上世纪中期，多方面证据都直接或间接地表明DNA是主要的遗传物质，而在缺乏DNA的某些病毒中RNA就是遗传物质。 3.肺炎球菌的转化 肺炎球菌 光滑型（S）菌株，能引起疾病。 粗糙型（R）菌株，不致病。 Griffith（1928）实验： 热杀死S型+活的R型同时注射到小鼠中，则小鼠死亡； 分别用热杀死S型或R型注射，则不致病； 说明S型中有一种物质能够进入R型，引起R型遗传变异。 第二节 DNA的分子结构与复制 两种核酸和它们的分布 DNA的化学结构 DNA的模型 双链DNA的不同构型 DNA的变性和复性 DNA的复制 早期对核酸化学性质的研究 虽然上世纪中才认识到DNA的生物学功能，核酸研究却已有一百多年历史： F.Mischer(1869)从外科绷带上脓细胞核中分离出一种不同于蛋白质的物质，含磷量高、并具有很强的酸性。他将这种物质称核质(nuclein)； A.Kossel(1879)发现酵母等核质具有A、G、T、C四种碱基； R.Altamm(1889)将核素命名为核酸(nucleic acid)。 Kossel(1901)又发现核酸中具有碳水化合物(糖)； P.A.T.Levene(1909)研究表明：酵母核酸含有五碳糖—核糖； Fisher(1914)人工合成核苷酸； P.A.T.Levene(1929)又发现动物胸腺细胞核酸含有脱氧核糖. Levene将前者命名为核糖核酸(RNA)，后者命名为脱氧核糖核酸(DNA)。并指出动、植物中均存在这两种核酸。 DNA的化学结构 关于碱基的种类、分子式、核苷酸的种类、结构等内容在生物化学中已经讨论。 在此谈三个关于核酸一级结构的内容： (一) “四核苷酸”假说； (二) 查伽夫定则及其意义； (三) 核苷酸序列及其测定。 “四核苷酸”假说 P.A.T.Levene(1930)提出“四核苷酸”假说，认为： 核苷酸是核酸的基本组成单位； 核酸是“磷酸—核糖(碱基)—磷酸”的核苷多聚体。 四核苷酸假说奠定了核酸化学基础。但同时认为： 核酸多聚体是由“四核苷酸结构”重复形成； 每个四核苷酸结构包含四种碱基各一个； 所以事实上认为在任何DNA中，四种碱基是等量的，DNA是四核苷酸结构的简单重复。 这种观念影响了人们对核酸生物学功能的进一步认识。 查伽夫定则及其意义 E.Chargaff