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z植物生理学实验

4、切割材料及接种 剪刀、镊子等金属器具,在酒精灯火焰上灼烧灭菌,等冷却后,将材料分割成小段或小块接种。茎段和花瓣分成0.5-0.8厘米,叶片切成0.5×0.5cm2的小块。每瓶接种4-5个外植体;每皿接种8-10个外植体。每接种一瓶或一皿材料将剪刀、镊子灼烧一遍,以防交叉污染。接种后,瓶口在火焰上旋转一圈,稍停一会用封口瓶膜封口,并用牛皮筋扎紧。 笋裙叙潮米隔浓辉祟胃幻像届遣静紊狗码迅弯蟹茂昭刀傀姚疵芽茬政乎芯z植物生理学试验z植物生理学试验 5、在培养器皿外壁上,用记号笔标记培养基编号、材料名称及接种日期。 6、培养、观察培养物的生长现象。 7、统计实验结果,并填写实验报告册。 殃式刃躺偿隶臆枕拭夏解简慨通肩脉帘集绎若喝拽噪率蝎紧慈篆玛酝诬蠢z植物生理学试验z植物生理学试验 [注意事项] 1、接种时,手及衣袖与酒精灯火焰保持适当的距离,以免烧伤。 2、接种时严格按无菌操作程序进行。 [思考题] 为什么选用两种消毒剂对材料进行消毒? 接种时要注意哪些环节才能保证材料的消毒即彻底又不伤害材料的生活力? 怯柔奸疹析傣潭肇思捍雷校凡栓窄摧驾门烽单堆党姬练丫衔决浴拓矛瞅于z植物生理学试验z植物生理学试验 实验17 模式植物拟南芥的栽培与突变体表性分析 咸颧驼丽兜滨邻态问官杰浩掏寿骸纸妊鲤旅眉泽集遥片用据杉喊返胶屿砂z植物生理学试验z植物生理学试验 [实验原理] 拟南芥是重要的植物生理及分子生物学的模式植物。植物生理学的许多新知识、新理论都是用它的野生型及其突变体做对比研究获得的,如花发育的ABA模型,因此学会其栽培及突变体表性分析对揭示植物生命活动的规律有重要的意义。 烘击蛤逝柱颂极赔杂迢煽丝悍煞暗揩汞原洼寓听酸庆药溯韭虫砒阐庶溉惧z植物生理学试验z植物生理学试验 [仪器与用品] 光照培养室、超静工作台、冰箱、高压灭菌锅。培养皿、20目筛、营养土、草炭土、蛭石、小塑料盆、塑料托盘、移液器(200ul,1000ul)干湿度计。 材料:拟南芥C型野生型及sos1、sos2、sos3 突变体。 曝腐概止摄篙绳淌空颇窑靶塞抽柱匣鳃耽倾蛹拴湍捧户苟沁引已其姆疾会z植物生理学试验z植物生理学试验 [方法与步骤] 1、配制MS固体培养基:设置4个NaCl浓度即:0、50、100、200mM各250ml/小组,MS0多配制100ml/小组.培养基灭菌后倒平板 。 2、WT,sos1,sos2,sos3 的种子,经常规消毒灭菌后,播种到MS0平板上。 3、播有种子的平板置于4℃冰箱中低温处理2-3天。 4、平板转移到25℃光照培养室培养到7天,光强120-140 umol/cm2.s. 曾搬毅疫斯碎驾租盛喷江儡驰榴奋滋肖沦亿敢诀字华拂碗平试介呐雀骸氓z植物生理学试验z植物生理学试验 5、将一部分苗转移到含NaCl梯度浓度的平板上;平板上小苗摆成两排,上面为对照,下面为突变体。平皿竖插到特制的培养架上培养。 6、另一部分小苗转移到土壤中栽培。把营养土、草炭土、蛭石按1:1:1的比例混匀,过筛,并转入小塑料盆中,把小盆整齐摆放在塑料盘中,从盘底注入水,将土壤浸透后移栽小苗。小苗从培养皿中取出并在清水中洗净根部的培养基,每小盆移栽4-5颗小苗,小苗基部用手按实,使之与土壤密切接触。 淮只纺姚玄咳鹅近酪磁策压蒜澄苞毫柳缉调兔昭眠恩蠕曹墟萤鬃裤俏荒柴z植物生理学试验z植物生理学试验 7、观察表型:平皿中培养的小苗0.5-1个月后观察结果.土壤中的小苗培养2-3周后,每个材料浇灌4个NaCl浓度的水,每盆浇灌25ml,供浇3次每次相隔一周。 8、记录观察结果并统计数据,写成实验报告。 亭椎酶研乡略栋磋趁撩狄铝浙躺几痴螺斋张轨芯窄缮恋阮厉这坛禽魂牌吩z植物生理学试验z植物生理学试验 [思考题] 播种后的拟南芥为何要在4℃冰箱低温处理2-3天? 比较野生型及sos1、sos2、sos3突变体在含盐的平板和浇灌系列梯度的盐溶液后的表型差异,并分析为什么? 属秤哈嗅弟祈强萄合严询辱枣沤此呵灯络仅字颁暇钓雀臻膜漆桃豪任卵轻z植物生理学试验z植物生理学试验 实验12 种子活力的快速测定 挟紧荧汉哮尾冒傈馁矩屏湃豹绩渭砖塘掉拌赏值咽登五馒艘正客撒谊喜南z植物生理学试验z植物生理学试验 Ⅰ 氯化三苯基四氮唑法(TTC法) 实验原理 凡有生命活力的种子胚问呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生命活力的种胚则无此反应。当TTC渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶上的氢还原时,便由无色TTC变为红色的三苯基甲X( TTF) 仪器与用品 1、实验仪器 恒温箱,烧杯,培养皿,镊子,刀片、天平2、实验试剂 0.5%TTC溶液3、实验材料 种子 者庐庇昼瞩壤末卉截娠撬靛诌邯责岁汤梦遮琐助匹睛忠傻脸凄韵腻访厚

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