恶臭假单胞菌ND6菌株catA基因的克隆和表达及其儿茶酚裂解途径探讨.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # #’ ( #)* 年 月 日 $%% ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! +,-. $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 恶臭假单胞菌!# 菌株 $#! 基因的克隆和表达 及其儿茶酚裂解途径探讨 ，， ， * $ # $ * # 赵化冰 ，陈 威 ，蔡宝立 * $ # （南开大学 生命科学学院 环境科学与工程学院 生物活性材料教育部重点实验室 天津 #%%%*） 摘 要：恶臭假单胞菌 菌株的萘降解质粒 中编码儿茶酚 ，双加氧酶的 基因在大肠杆菌中进行 BC DBC1* * $1 !#$ 了克隆和表达，并研究表达产物的酶学性质。结果表明：酶的 为 ， 为 （ · ）；具有 %4 % E%*) 490F G 45H *E!#! 490F 46- 4I ! ! 很好的耐热性，在 $ M 保温 后仍能够保留酶活力的 ； 对酶活性有显著的促进作用，其比活力是对 2%J !246- )# E K L. 照反应的 ；酶对 氯儿茶酚的催化活性非常低，属于 型儿茶酚 ，双加氧酶。以萘为底物生长时， 菌 $)$ K !1 * $1 BC 株的细胞提取液中既存在催化邻位裂解途径的儿茶酚 ，双加氧酶活性，也存在催化间位裂解途径的儿茶酚 ， * $1 $ #1 双加氧酶活性。以苯甲酸、对羟基苯甲酸和苯乙酸为唯一碳源生长时， 菌株细胞提取液的儿茶酚 ，双加氧 BC * $1 酶活性远远大于儿茶酚 ，双加氧酶活性。表明 菌株既能通过儿茶酚间位裂解途径降解萘，也能通过儿茶酚 $ #1 BC 邻位裂解途径降解萘，而以苯甲酸、对羟基苯甲酸和苯乙酸为诱导物时只利用儿茶酚邻位裂解途径。 关键词：恶