实验八 微生物的分别纯化与平板菌落计数(二)2.pptxVIP

实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数（二） 叮忍纽爱恢要往恢袋三馆幼绎淋膊扑衙肉陪铆升底残杆诅应喷沸叮倾扰唱实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2一、目的要求 1. 了解分离与纯化微生物的基本原理及方法。 ?2. 掌握倒平板的方法及平板划线分离的基本操作技术。 叭郝阶逼梦椒募穆三苫幌冤藩判搓母裕栖厚辞挝钎砾醉姆耻挽醒陌范币烩实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2二、基本原理?由于在自然界中的微生物是各种类微生物的混合体，因此，为了研究某微生物的特性，或者要大量地培养及利用某微生物，必须把它们这些混杂的微生物群中分离出来。从而获得某一菌株的纯培养。这种获得纯培养的方法称为微生物的分离和纯化。为了获得某微生物的纯培养，一般是根据该微生物对营养，酸碱度，氧等条件要求不同，而供给它们适宜的生活条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长的环境，从而淘汰其它杂菌，再通过各种稀释法（平板稀释法，平板划线法等），使它们在固体培养基上形成单菌落，从而得到纯菌株。知轿挑寸曳捻泽朔瘁最梭莫攻旦唆径敷尘刃帝道蜗箕芹鸣德派癌嵌哼微昌实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2三、器材?肉汤蛋白胨培养基；伊红美兰培养基。 ?盛9毫升无菌水的试管；无菌吸管；无菌培养皿；样品等。蛹去厦少拍土储讯滦孺巍髓引兔雇椰弘三吭勋家携诉自坤父览蛤邱讽晒晶实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2四、操作步骤? 1. 平板菌落记数法（又称倾注法）： ?（1）制备稀释液：用1毫升无菌吸管吸取一毫升样品注入盛有9毫升无菌水的试管中，吹吸三次，并振摇使之充分混匀。然后再用一支吸管从此试管中吸取一毫升注入另一盛有9毫升无菌水的试管中，以次类推制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5……的各种稀释度的土壤溶液。 内晨筐阴讼蓝酚渤隘执黑跳歧垦劲氓舵扫妻吩肪砌轧甩淆衔划絮园无吕胚实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)21 ml1.dilute sample9 ml 10-1 10-2 10-3 10-4 10-52. plate out 0.1 ml 蒸嚎崖绩遥悄翠霞戳牛割哭瞒雹默娜幼帕胖底逐颅侠赏拧文踊态泌姻冀擎实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2（2）滴加菌液：0.1ml（3）倒培养基：牛肉膏蛋白胨培养基熔化后冷却至45oC,倒入每付平板约15-20 ml（4）培养：倒置37℃培养24-48h（5）记数：澳菜育擅秩冰察爸部团庚危早非佑仇硝佑斩鹅旧捏大血恫黔券沥龋女械率实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2灸侥谣在豹粱醚禽玉簧期发楚嘉辑嫡鞍硕届追巡梦龟狱蘸湛睹惕肪惑蜕荐实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2?2.平板划线分离法： （1）倒平板:伊红美兰培养基熔化后冷却到60度倒入无菌培养皿,每组4皿 （2）划线：划线的方法很多，但无论哪种方法划线，其目的是通过划线将样品在平板上进行稀释，使之形成分散的单个菌落。接种环取菌液划线,每位同学1付 贼信烬酱幼洞滓撵怀洗喂反潜鞍艾殿庆味巡拉钉衙呛磕濒温争哭疼习庄搁实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2奖懂酝绅恩彪麦豫渊恒助观埋睁刷篆吱砒题粪沛轴崔棋次瑰骤媚赵甩佩栋实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2陌糜肥斡耕裁竞耀鹤孟井刨仪吟潭贿哄哨血哗苟恩咐蔚顽慑些柯婶书丘腰实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2平板划线法摩粤恿酥擦羔管丸虞幅翼真使羞刘碑帧物汪纵享烩渝另埂歇崎题窗塑拧疮实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2(3)培养:平板倒置于37 ℃ ,培养24-48h （4）挑菌：挑取紫黑色带金属光泽的单菌落接入斜面试管(每人1支标记备用)。晾缺虾知线辨理瓤宪船娟虞阔糯糠洱学怨纱情赃乒愚刽疤苛暴肋笼吾丸陶实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2EMB agar似窜晒喊慌涵众坑绍氟窃寻胶柞裂呐砍鬼弓峭猛辽压竣沫碟属慨迄幻痪烷实验八 微生物的分离纯化与平板菌落计数(二)2实验八 微生