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常用实验动物的基本操作
常用实验动物的基本操作 一、 实验动物的选择及捉拿固定 正确掌握动物捉拿固定的方法,可以防止动物过度挣扎或受损伤而影响实验观察效果,并可避免实验者被咬伤,从而保证实验顺利进行。下面介绍药理学实验课中常用的几种动物的捉拿固定方法。 小白鼠 小 鼠 抓取时先将小鼠放在粗糙物(如鼠笼)上面,用右手提起鼠尾, 将小鼠轻轻向后拉,这样可使小鼠前肢抓住粗糙面不动,用左手拇指和食指捏住鼠头皮肤和双耳,其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部,这样小鼠便可被完全固定在左手中(图1),此时右手可作注射或其它实验操作,也可将小鼠固定在特制的固定器中。 大白鼠 大 鼠 为防大鼠在惊恐或激怒时咬伤手指,实验者应带上棉手套或帆布手套,先用右手将鼠尾提起,放在粗糙物上,向后轻拉鼠尾,使其不动,再用左手拇、食指捏住头颈部皮肤,其余三指和手掌固定鼠体,使其头、颈、腹呈一直线(图2),这时右手可作注射,若需进行手术,则应对大鼠进行麻醉后固定于手术台上。如需尾静脉取血或注射,可将大鼠放入固定盒内或用小黑布袋装大鼠,使其只露尾巴。 豚鼠 豚 鼠 豚鼠胆小易惊,性情温和,不咬人,抓取幼小豚鼠时,只需用双手捧起来,对体型较大或怀孕的豚鼠,先用手掌迅速扣住鼠背,抓住其肩胛上方,以拇指和食指环握颈部,另一只手托住其臀部(图3)。 新西兰兔 兔比较驯服,一般不会咬人,但脚爪较尖,应避免抓伤。抓取时轻轻将兔提起,另一手托其臀部,使其躯干的重量大部分集中在该手上,然后按实验需要将兔固定成各种姿势(图4)。注意抓兔时不要单提两耳,因为兔耳不能承受全身重量,易造成疼痛而引起挣扎,因此单提兔耳,捉拿四肢,提抓腰部和背部都是不正确的抓法。 二 实验动物的编号 在动物实验时,常常需要编号分组,将动物做上不同的标记加以区别。标记的方法很多,常用的编号标记方法有染色法、挂牌法和烙印法。家兔等较大动物可用特制的号码牌固定于耳上,而小动物则常用染色法。染色法是药理学实验课中最常使用的方法,通常用化学试剂涂染动物背部或四肢一定部位的皮毛,代表一定的编号,常用染色的化学试剂有: 黄色:3%-5%苦味酸溶液 咖啡色:20%硝酸银溶液 红色:0.5%中性红或品红溶液 黑色:煤焦油的酒精溶液 (1)1-10号标记法:编号的原则是先左后右,从前到后,如将动物背部的肩、 腰、臀部按左、中、右分为九个区,从左到右标记1-9号,第10号不作标记(图6)。 (2)10-100号标记法:在上述编号的同一部位,用各种不同颜色的化学试剂擦上斑点,就可代表相应的十位数,例如涂上黄色的苦味酸代表1-10号,涂上红色的中性红代表11-20号,涂上咖啡色的硝酸银代表21-30号,以此类推。 实验动物的给药方法 1、大小鼠 皮下注射法 通常选择背部皮下注射,操作时轻轻拉起背部皮肤,将注射针刺入皮下,把针尖向左右摆动,易摆动说明针尖确已刺入皮下,然后注射药液,拔针时,以手捏住针刺部位,防止药液外漏(图8),注射药量为0.1-0.3ml/10g。 灌胃法 以左手捉住小鼠,使其腹 部朝上,右手持灌胃器。操作时, 先从小鼠口角将灌胃管插入口腔 内,然后用灌胃管向后上方压迫小 鼠头部,使口腔与食道呈一直线, 再将灌胃管沿着上颚壁轻轻推入食 道(图7),当推进约2-3cm时可 稍感有阻力,表明灌胃管前部已到 达膈肌,此时即可推进注射器进行 灌胃,若注射器推注困难,应抽出 重插,若误入气管给药。 腹腔注射法 以左手固定小鼠,腹部向上,注射部位应是腹部的左、右下外侧1/4的部位,因为此处无重要器官。用右手将注射器针头刺入皮下,沿皮下向前推进3-5mm,接着使针头与皮肤呈45度角刺入腹肌,继续向前推进,通过腹肌进入腹腔后感觉抵抗力消失,此时可注入药液,一次注射量为0.1-0.2ml/10g体重(图9)。 静脉注射法 一般采用尾静脉注射,事先将小鼠固定,使尾巴露出,尾巴于45-50℃的温水中浸泡半分钟或用75%的酒精棉球擦拭,使血管充血,选择尾巴左右两侧静脉注射,如针头确已在血管内,推注药液应无阻力,注射时若出现隆起白色皮丘,阻力增大,说明未注入血管,应拔出针头重新向尾根部移动注射。 2、兔 灌胃法 需要两人合作,助手就坐,将家兔的躯体夹于两腿之间,左手紧握双耳固定头部,右手抓住双前肢固定前身。术者将木或竹制的开口器横放在家兔的上下颌之间,固定于舌头之上,然后把合适的导尿管经开口器中小孔,沿上颚壁慢慢插入食道约15-18cm,此时可将导尿管外口端置于一杯清水中,若无气泡逸出,说明确已插入食道,这时可用注射器注入药液,然后用少许清水冲洗导尿管,灌胃完毕,应先捏闭导尿管外口,拔出导尿管,再取出开口器(图11)。 静脉注射法 注射部位一般采取耳缘静脉。可用酒精棉球涂擦耳部边缘静脉部位的皮肤, 以左手食指放在耳下将兔耳
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