11圆二色谱Circular Dichroism(CD).pdfVIP

圆二色谱Circular Dichroism (CD) 主要内容 CD原理 蛋白质CD谱 CD 实验要点 CD原理 平面偏振光(Plane polarized light) E M 平面偏振光 振动方向保持不变 振幅发生周期性变化 E vectors Polarizer 旋光色散(Optical rotatory dispersion) 一束平面偏振光通过光学活性分子后，由于左、 右圆偏振光的折射率不同，偏振面将旋转一定 的角度，这种现象称为旋光(Optical rotation) ， 偏振面旋转的角度称为旋光度。 朝光源看，偏振面按顺时针方向旋转的，称为 右旋，用“+”号表示；偏振面按逆时针方向旋 转的，称为左旋，用“-”号表示 旋光度 α = [α]lc 2 -1 [α]是旋光物质的比旋光率，单位是度•厘米 • 10克 对同一物质，[α]值与波长有关 旋光率与波长的关系称为旋光色散(Optical rotatory dispersion, ORD) 旋光色散 旋光色散常用摩尔比旋[Φ]表示。 [Φ] = [α]*M/100 M为旋光介质的分子量 圆偏振光(Circular polarized light) 振幅保持不变，而方向周期变化， 电场矢量绕传播方向螺旋前进 圆偏振光 朝光源看， 电场矢量方向按顺时针方向旋转的，称为右圆偏振光； 电场矢量方向按逆时针方向旋转的，称为左圆偏振光。 圆二色性(circular dichroism, CD) 光学活性分子对左、右圆偏振光的吸收也不 同，使左、右圆偏振光透过后变成椭圆偏振 光，这种现象称为圆二色性。 圆二色性的表示 吸收(率)差 Δε = ε - ε L R ΔA = A – A L R 椭圆度θ ，摩尔椭圆度[θ] θ=2.303(A – A )/4 L R [θ] = 3298(ε - ε )≈3300 (ε - ε ) L R L R 在蛋白质研究中，常用平均残基摩尔椭圆度 旋光色散与圆二色性 叠加原理 一束自然光可以分解或看作两束相互垂直而没有相位关系 的平面偏振光的加和。 平面偏振光可以分解成两束相位相等而旋转方向相反的 圆偏振光的加和。 当振幅相等，并同步的左、右圆偏振光相加，则产生平面 偏振光；如果这两束圆偏振光的振幅不等则产生椭圆偏 振光(elliptically polarized light) 两束相互垂直而相位相差1/4波长的平面偏振光可以加和 成一束圆偏振光 旋光色散与圆二色相互转换 旋光色散和圆二色是同时产生的，他们包括同 样的分子结构信息，并且可以由Kronig- Krammers转换方