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第2章 培养条件 - 副本
第二章 细胞培养的条件;;; 二、糖
(1)葡萄糖是机体活动能量的主要来源。
(2)维持渗透压。
三、氨基酸
氨基酸是组成蛋白质的基本单位。
(1)12种基本氨基酸:精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、苏氨酸、缬氨酸、胱氨酸及酪氨酸。 ;;;; 五、无机离子和微量元素
(1)钠:维持渗透压,可使细胞外质溶胶化粘度下降,细胞内粘度上升,增加组织细胞的应激性与增高细胞膜的渗透性,有利于细胞内外物质的转运 。
(2)钾 :钾是激活细胞内某些酶所必需的。缺钾细胞变圆,胞质内颗粒增加,细胞界限不清楚,并产生一种特殊的树枝形细胞,24小时后细胞脱落死亡。
(3)钙:钙对维持细胞膜的坚固和渗透性、对保持神经和肌肉组织的正常兴奋性有很大作用。许多酶必须有钙的存在才有活性,钙对细胞粘着性和贴壁能力也很重??? 。;(4)镁:在细胞内镁是糖代谢某些酶系统的参加者,镁对细胞的贴壁也有重要作用,
(5)磷:磷酸盐是细胞和细胞间液的组成成分,它参与一切基本物质如蛋白质、碳水化合物、脂肪、维生素的代谢,是能量ATP必不可缺的成分,可形成高能磷酸键以供细胞生命活动所需之能量。另外,它对维持组织内的酸碱平衡起着重要作用。
(6)碳:重碳酸盐与CO2对细胞的生长和增殖很重要,它能使培养物产生最大糖分解以利细胞生长,可维持和调节培养基的pH。
(7)微量元素:铁、锌、硒等微量元素对维持细胞的正常生理功能也同样起着重要作用。;;;;第二节 影响细胞生长的因素;;;; 六、细胞接种浓度(密度)
培养液与细胞的容积比应小于2000:1,接种密度太低或太高都不利于细胞的生长增殖,如果接种密度太高,每个细胞周围培养液的容积降至0.007mm3以下,妨碍细胞的增殖。
七、容器转动速度和悬浮搅动速度
搅拌速度既不能太快,也不能太慢。
太慢,细胞易结团、下沉和贴壁;太快,容易起泡沫,细胞易窒息致死,搅动易使细胞受机械损伤。
BHK21的搅拌速度适宜为460~330r/min;淋巴细胞( Raji )株,在200 r/min 和400 r/min ;类淋巴细胞( Namalva )在80~100 r/min 。
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