04_抗体-3学时.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 1984年 诺贝尔医学奖奖 Jern、Kohler、Milstein * * 一、IgG的特性和功能 ?血清和胞外液中含量最高的Ig，占血清总Ig的75%～80%； ?半寿期约20～23天，是再次免疫应答产生的主要Ab； ?是唯一能通过胎盘的Ig，发挥自然被动免疫功能； ?出生后3个月开始合成，3～5岁接近成人水平； ?具有活化补体经典途径的能力（IgG3>IgG1>IgG2）； ?发挥调理作用、ADCC和结合SPA(IgG1、IgG2和IgG4)； ?某些自身抗体、参与Ⅱ型、Ⅲ型超敏反应的抗体也属IgG。 是抗感染的“主力军” 四种亚类的IgG分子在血清中的浓度不同， 所发挥的生物学特性亦不相同 二、IgM的特性和功能 ?分泌型IgM为五聚体，分子量最大，称为巨球蛋白（macroglobulin），占血清总Ig的5%?10%。一般不能通过血管壁，主要存在于血液中； ? 是个体发育中最先出现的Ig，胚胎晚期即能产生，脐带血IgM 增高提示有宫内感染（如风疹病毒、巨细胞病毒感染等）； ? 抗原初次刺激机体时，是体内最先产生的Ig；血清IgM升高， 说明有近期感染； 有强大激活补体能力； 天然血型抗体是IgM； ? 单体IgM以膜结合型（mIgM）表达于B细胞表面，是BCR的主要成分。仅表达mIgM是未成熟B细胞的标志。 是抗感染的“先头部队” IgM J 链 分 泌 型 IgM 膜 型 IgM mIgM Iga Igb Iga Igb 三、IgA的特性和功能 ?有血清型（为单体）和分泌型（SIgA）（为二聚体）； ? SIgA 主要由黏膜相关淋巴组织产生，存在于唾液、 泪液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中 和黏膜表面，是机体黏膜局部抗感染免疫的重要因素； ?生后4～6个月开始合成； ? 初乳中的SIgA可对婴幼儿发挥自然被动免疫作用； ? 调理吞噬、中和毒素。 是抗感染的“边防军” 四、IgD的特性和功能 分两型：血清型和膜结合型。 ? 血清中IgD含量很低（仅占血清Ig总量的0.3%），其生物学作用尚不清楚 。 IgD可在个体发育的任何时间产生。 ? 膜结合型IgD（mIgD）可作为B细胞发育成熟的标志，成熟B细胞同时表达 mIgM和mIgD。 mIgM mIgD 成熟B细胞 活化B细胞 未成熟B细胞 五、IgE的特性和功能 ?是正常人血清中含量最少的Ig； ?主要由呼吸道、胃肠道粘膜固有层的浆细胞产生； ?是亲细胞抗体，其CH2和CH3结构域可与肥大细胞、嗜 碱粒细胞表面的高亲和力FcεRI结合，介导I 型超敏反应。 ?可能与机体抗寄生虫免疫有关。 IgE之外的抗体 IgE是亲细胞抗体，游离状态即可与肥大细胞、嗜碱粒细胞表面FcεR结合，介导Ⅰ型超敏反应。 第五节 人工制备抗体 ? 多克隆抗体 ? 单克隆抗体 ? 基因工程抗体 多克隆抗体（polyclonal antibody，pAb） 用含多种抗原决定基的抗原物质免疫动物，刺激多个B细胞克隆活化所获得的免疫血清（含多种抗体的混合物），此为多克隆抗体。 优势：作用全面，来源广泛，制备容易； 缺点：特异性不高、易发生交叉反应。 带有多个表位 抗原 针对不同表位的B细胞 克隆增殖 多种抗体的混合物 （多克隆抗体） 刺激小鼠 单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb) 由单一杂交瘤细胞产生，针对单一抗原表位的特异性 抗体。 优点：结构均一、纯度高、特异性强、效价高、交叉反应少或无、制备成本低。 缺点：鼠源性单抗对人有较强的免疫原性，反复应用可诱导人抗鼠免疫应答，削弱其作用，甚至导致机体组织细胞的损伤。 Georges Kohler and Cesar Milstein, 1975, discovered monoclonal antibody 基因工程抗体 又称重组抗体。 借助DNA重组技术和蛋白质工程技术，按人们的意愿在基因水平上对Ig进行切割、拼接或修饰，重新组装成为新型抗体分子。 基本思路是将部分或全部人源抗体的编码基因，或克隆到真核或原核表达系统中，体外表达人-鼠嵌合或人源化抗体；或转基因至剔除自身抗体编码基因的小鼠体内，主动免疫诱生人源抗体。 人-鼠嵌合抗体 完全人源化抗体：将小鼠Ab基因敲除，转染以人Ab编码基因，此种转基因小鼠，在Ag 刺激下，