纹腹叉鼻鲀（Arothron hispidus Linnaeus）淋巴囊肿病的研究.pdfVIP

Li nnaeus)淋巴囊肿病的 hispidus 纹腹叉鼻纯(Arothron 研究 摘要 ． 运用石蜡包埋切片法、组织化学方法和电子显微镜技术，对纹腹叉鼻鲍的鳍 上的囊肿物的组织病理结构和组织化学性质进行了研究。结果显示，其囊肿物是 由膨大的细胞聚集而成，细胞大小380—4009m，细胞核变得不规则，核内染色质 边集，细胞质边缘有点状或块状的嗜碱性、呈Feulgen和Mann氏反应阳性的包 涵体，高电子密度的包涵体周围有六角形的病毒粒子，直径约200nm，是典型的 虹彩病毒。细胞膜外有一厚层均质的、呈PAS反应阳性的包膜，这些病理组织 特征都是鱼类淋巴囊肿病的典型特征。6月份时囊肿物已变得很小，电镜下未看 到病毒粒子，结缔组织内观察到细胞的崩解和碎片，此时病鱼正处于病愈恢复期。 根据牙鲆淋巴囊肿病毒的主要核衣壳蛋白序列，建立了巢式PCR技术来检 测该病毒，其中外侧引物Pl和P2的扩增产物大小为348bp，内侧引物P3和P4 7 的扩增产物的大小为172bp。敏感性实验表明，巢式PCR要比常规PCR灵敏10 倍。运用巢式PCR技术，检测了4月份和6月份的患病纹腹叉鼻纯的囊肿物， 结果表明4月份的样品有淋巴囊肿病毒，而6月份的样品则没有，与电镜观察结 果一致。 用本实验室研制的鼠抗牙鲆淋巴囊肿病毒的单克隆抗体作为一抗，对纹腹叉 鼻鲍的囊肿物的冰冻切片进行间接免疫荧光抗体染色，结果在荧光显微镜下观察 到囊肿细胞的细胞质发出绿色荧光，而囊肿细胞的细胞核及周围的结缔组织无绿 色荧光。对囊肿物冰冻切片进行免疫金一银染色，结果显示囊肿细胞的细胞质呈 阳性黑色，而结缔组织为阴性。这些结果都表明在囊肿细胞的细胞质内有淋巴囊 肿病毒粒子存在。 对纹腹叉鼻鲍的淋巴囊肿病进行治疗的结果显示用氯霉素、土霉素、红霉素、 福尔马林药浴或注射病毒唑都无明显治疗效果。而在水族馆的24—25℃水温环境 内，将水族箱内加入50ml／m3过氧化氢(3％)进行药浴，囊肿能够缩小。 关键词：纹腹叉鼻鲑，淋巴囊肿病毒病，组织病理学，POR技术，免疫组织化学 of diseaseArothron on hispidus Studies lymphocystis Linnaeus Abstract featuresof ofArothron The andhistochemicallymphoeystis histopathological and electron and Linnaeusarestudiedlight transmission hispidus using microscopy are in histochemicalmethods．The cells diameter．The lymphocystis380-400Hm cllromatin nucleusis in andthe is