质谱联用法-农业部.docVIP

附件：9 中华人民共和国国家标准 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 国家食品药品监督管理总局 201×-××-××发布 201×-××-××实施 前 言 本标准首次发布。 食品安全国家标准 植物源性食品中灭瘟素残留量的测定 液相色谱-质谱联用法 范围 本标准规定了植物源性食品中灭瘟素（blasticidin-S）残留量的液相色谱-质谱联用测定方法。 本标准适用于植物源性食品中灭瘟素农药残留量的测定。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样中灭瘟素用乙酸水溶液萃取，再经净化处理后，采用液相色谱-质谱联用法检测，外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯试剂和符合GB/T 6682规定的一级水。 4.1试剂 4.1.1 乙酸（CH3COOH，CAS 号：64-19-7），色谱纯。 4.1.2 乙腈 （CH3CN，CAS 号：75-05-8），色谱纯。 4.1.3 甲酸（ HCOOH，CAS 号：64-18-6），色谱纯。 4.1.4 甲酸铵（ HCOONH2，CAS 号：540-69-2）。 4.1.5 甲醇（CH3OH，CAS 号：67-56-1），色谱纯。 4.2 溶液配制 乙腈溶液（10+90）：将100 mL乙腈加入到900 mL水中，混匀。 乙酸-乙腈-水（2+10+88）：将2 mL乙酸、10 mL乙腈加入到88 mL水中，混匀。 甲酸-甲醇溶液（10+90）：将100 mL甲酸加入到900 mL甲醇中，混匀。 4.2.4 20 mmoL/L甲酸铵水溶液（pH=3.5）：称取0.385g乙酸铵溶解于适量水中，用水定容至1000 mL，用乙酸调PH至3.5。 标准品 灭瘟素标准品（C17H26N8O5，CAS 号：2079-00-7），纯度≥99.6%。 标准溶液配制 4.4.1 标准储备溶液（100 mg/L）：准确称取10 mg（精确到0.1 mg）灭瘟素标准品于50 mL烧杯中，用乙腈溶液（4.2.1）溶解并转移至100 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，混匀，-18℃冷冻避光保存，有效期3个月。 4.4.2 标准工作溶液（10 mg/L）：吸取1 mL标准储备溶液，加到10 mL容量瓶中，用乙腈溶液（4.2.1）定容，-18 ℃冷冻避光保存，有效期1个月。 材料 4.5.1 固相萃取柱：弱阳离子交换固相萃取小柱（500 mg/6 mL，带羧基官能团的弱阳离子交换柱）。 4.5.2 滤膜：0.22 μm，水系。 4.5.3 十八烷基键合硅胶（C18）：40 μm ~ 60 μm。 仪器和设备 5.1液相色谱-串联质谱：配电喷雾离子源（ESI）。 分析天平：感量0.000 1 g和感量0.0 1 g。 组织捣碎机。 离心机：转速不低于10000 r/min。 旋转蒸发器。 振荡混合器（1200次/min）。 涡旋混合器。 试样制备 蔬菜、水果和食用菌样品按相关标准取一定量，取样部位按GB 2763规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆。匀浆放入聚乙烯容器中。 取谷类样品500 g，粉碎后使其全部可通过425 μm的标准网筛，放入聚乙烯瓶或袋中。取油料作物、茶叶、坚果和香辛料样品各500g，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯瓶或袋中。 植物油类搅拌均匀。 试样于-18℃以下温度条件下保存。 分析步骤 7.1提取 7.1.1谷类、茶叶、香辛料、坚果、植物油 称取5 g(精确到0.01 g)试样于100 mL离心管中，参见附录A补水，涡旋振荡2 min。加入20 mL 乙酸-乙腈-水溶液（4.2.2），涡旋2 min，振荡提取30 min后，以8 000 r/min转速离心10 min，倾出上清液，向装残渣的离心管中加入20 mL乙酸-乙腈-水溶液（4.2.2）重复上述提取步骤两次，合并上清液，用提取液定容至100 mL，混匀，待净化。 7.1.2水果、蔬菜、食用菌 称