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内容提要 本文研究了有机溶剂中嗜热酶 APE1547 催化布洛芬的酯合 成反应。考察了酰基受体、底物摩尔比、有机溶剂、温度、水活 度对于嗜热酶APE1547的催化活力与立体选择性的影响。在最适 条件下，嗜热酶APE1547的催化活力为216.5μmol/g/h，E 值为 38.9，而当此反应的转化率为57%时，(S)-布洛芬的对映体过量 值为99%(ee)。 将微波引入用来促进有机溶剂中布洛芬的酶促酯合成反应。 考察了微波功率等反应条件对嗜热酶 APE1547 的活性和立体选 择性的影响。最终确定了最佳反应条件。在该条件下，嗜热酶 APE1547 的酶活为4.16 μmol/mg/h ，E 值为 52.9 。与传统振荡加 热方式相比，酶的活性和立体选择性都得到了大幅度的提高。 目 录 第一章 绪论 1 1.1 生物催化与生物转化1 1.1.1 生物催化与生物转化的定义 1 1.1.2 生物催化与生物转化的研究进展 1 1.1.3 生物催化在药物合成中的应用 2 1.1.4 生物催化技术合成手性化合物 2 1.2.手性药物的发展前景3 1.3 布洛芬3 1.3.1 布洛芬的定义及研究进展 3 1.3.2 布洛芬拆分方法 4 1.4 微波6 1.5 本论文设计思路7 第二章 嗜热酶催化拆分布洛芬 8 2.1 研究背景8 2.2 本章研究内容介绍 9 2.3 实验材料和方法10 2.3.1 材料 10 2.3.2 制备重组酶 APE1547 10 2.3.3 水活度(a )的控制和测定 10 w 2.3.4 酶催化布洛芬的酯化反应 10 2.4 结果和讨论12 2.4.1 酰基受体的影响 12 2.4.2 底物摩尔比率的影响 13 2.4.3 有机溶剂的影响 14 2.4.4 反应温度的影响 14 2.4.5 水活度的影响 15 2.4.6 干燥剂的影响 16 2.5 结论18 第三章 微波辅助酶促拆分布洛芬 19 3.1 研究背景19 3.2 实验材料和方法20 3.2.1 材料 20 3.2.2 仪器 20 3.2.3 制备 APE 154720 3.2.4 酶催化布洛芬酯化反应 20 3.2.5 酶的重复使用 20 3.2.6 分析方法 21 3.3 结论22 3.3.1 比较微波加热和传统震荡加热的作用效果 22 3.3.2 微波功率的影响22 3.3.3 温度的影响23 3.3.4 pH 的影响 24 3.3.5 酶用量的影响24 3.3.6 酶的重复使用 25 3.4 结论 25 本文总结 26 参考文献 27 个人成果 36 致 谢 38 中文摘要 39 Abstract 40 第一章 绪论 1.1 生物催化与生物转化 1.1.1 生物催化与生物转化的定义 生物催化（biocatalysis ），是利用酶或有机体（细胞、细胞器、组织等等） 作为催化剂实现化学转化的过程，这种反应过程又称为生物转化 (biotransformation) [1]。 利用生物体系做为催化剂，从而实现了运用生物催化和转化技术来合成有机 物，它是由生物学、有机化学、合成化学相交叉联系的一门学科。生物催化具有 高选择性、高效性、高温和性等特点。即便酶存在生物体外，也可以加快人工合 成和天然的化学分子的转化反应速率，这一点充分表现出了酶具有良好的区域选 择性、立体选择性