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MicroRNA-1调控人结肠癌细胞周期及其机制的研究-中国细胞生物学学报.PDF
– DOI: 10.11844/cj cb.2017.03.0292
中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2017, 39(3): 271 279
研究论文
MicroRNA-1调控人结肠癌细胞周期及其机制的研究
1# 2# 2 2*
陈通克 陈林华 王 教 王丽花
1 2
( 温州医科大学实验动物中心, 温州325000; 温州医科大学眼视光学院, 温州325027)
摘要 该研究通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-1(miR-1)转染入人结肠癌细胞
HT-29和HCT 116, 使其过表达。应用MTS法、克隆形成实验、流式细胞术检测转染后细胞增殖及
细胞周期的变化情况, 结果发现, miR-1能使HT-29和HCT 116细胞周期滞留在G1期, 显著抑制细胞
的增殖; 通过靶基因预测及荧光素酶分析法预测并确定CCND1(cyclin D 1)和CDK6(cyclin dependent
kinases 6)是miR-1作用的靶基因。采用Western blot法检测细胞内相关蛋白质表达水平, 结果发
现, miR-1能下调HT-29和HCT 116 中细胞周期相关蛋白CDK2 、CDK4 、p-Rb(retinoblastoma gene) 、
E2F 1(E2F transcription factor 1) 、p-Cdc2(cell division cycle 2)等蛋白质水平。通过人结肠癌裸鼠动
物模型检测miR-1对结肠癌细胞体内成瘤能力的改变情况, 研究发现, miR-1能在体显著抑制人结肠
癌细胞增殖能力。该研究表明, miR-1通过下调靶基因cyclin D1 、CDK6的表达, 并影响细胞周期相
关蛋白CDK2 、CDK4的水平, 下调了决定细胞周期进程的关键蛋白Rb及Cdc2的磷酸化水平, 同时
也降低了E2F 1蛋白质水平, 使细胞周期滞留在G1期, 从而抑制了细胞增殖。
关键词 microRNA-1; 人结肠癌; 增殖; 细胞周期
The Mechanism of MicroRNA-1 Regulating the Cell Cycle in Human Colon Cancer
1# 2# 2 2 *
Chen Tongke , Chen Linhua , Wang Jiao , Wang Lihua
1
( Laboratory Animal Center, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, China ;
2School of Ophthalmology and Optometry, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325027, China)
Abstract microRNA-1 was transfected into human colon cancer cell line HT-29 and HCT 116. The
proliferation of HT-29 and HCT 116 cells was examined by MTS cell proliferation assay and
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