原核生魏惋与真核生物转录起始调控的差异.pptVIP

一、RNA聚合酶能直接启动RNA链的合成 RNA聚合酶由多个亚基组成 原核生物的RNA聚合酶 原核生物转录起始 核心酶 全酶 二、RNA聚合酶结合到DNA的启动子上起动转录 转录是不连续、分区段进行的。 每一转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)。操纵子包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。调控序列中的启动子是RNA聚合酶全酶结合到模板DNA的部位，也是控制转录的关键部位。 五种E.coli启动序列的共有序列 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合: 受保护的DNA片段：40-60碱基对。 2. DNA双链局部解开，形成开放转录复合体(open transcription complex) ； 1. RNA聚合酶全酶(2)与模板结合，形成闭合转录复合体(closed transcription complex) ； 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物： RNApol (2) - DNA - pppGpN- OH 3 转录起始复合物: 5-pppG -OH + NTP  5-pppGpN - OH 3 + ppi 三、转录起始过程： E.coli的转录起始和延长 第一个磷酸二酯键生成后，σ亚基即从转录起始复合物上脱落，核心酶连同四磷酸二核苷酸，继续结合于DNA模板上，酶沿DNA链前移，进入延长阶段。 一、转录起始需要启动子 、RNA聚合酶和转录因子的参与 真核生物的转录起始 1.转录起始前的上游区段具有启动子核心序列 不同物种、不同细胞或不同的基因，转录起始点上游可以有不同的DNA序列，但这些序列都可统称为顺式作用元件(cis-acting element)。 顺式作用元件包括启动子、启动子上游元件等近端调控元件和增强子等远隔序列。 起始点上游多数游共同的TATA序列，称为TATA盒。通常认为这就是启动子的核心序列。 启动子上游元件是位于TATA盒上游的DNA序列，多在转录起始点约-40~-100nt的位置，比较常见的是GC盒和CAAT盒。 增强子是能够结合特意基因调节蛋白，促进邻近或远隔特定基因表达的DNA序列。 结构基因 -GCGC---CAAT---TATA 真核生物启动子保守序列 2.真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶 TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 真核生物酶的特点 真核生物RNA聚合酶的结构比原核生物复杂，所有真核生物的RNA聚合酶都有两个不同的大亚基和十几个小亚基. RNA聚合酶Ⅱ由十二个亚基组成，其最大 的亚基称为RBP1 RNA聚合酶Ⅱ最大亚基的羧基末端由一段为Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser的重复序列片段，称为羧基末端结构域。它对于维持细胞的活性是必须的。 3.转录因子 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子(trans-acting factors)。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子，形成转录起始复合物(pre-initiation complex, PIC) 。 当合成一段含有60～70个核苷酸的RNA时，TFⅡE和TFⅡH释放，RNA聚合酶Ⅱ进入转录延长期。 综上，原核生物与真核生物转录起始调控的差异主要有： 原核生物聚合酶仅有一种，有多个亚基。真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶，有两个不同的大亚基和十几个不同的小亚基。 原核生物RNA聚合酶可直接结合DNA模板，而真核生物RNA聚合酶需与辅助因子结合后才结合模板。 原核生物 1 .RNA聚合酶要结合到DNA模板上 2. DNA双链局部打开，使其中一条链作为转录模板 真核生物 1.转录起始前的上游区段具有启动子核心序列 2.RNA-pol不能直接结合模板 3.RNA聚合酶Ⅱ启动转录时需要转录因子才能形成转录复合体。 3.转录起始需注意的问题 4.原核基因转录调节特点： σ因子决定RNA聚合酶识别特异性 操纵调控模式在原核基因转录起始的调节中具有普遍性 原核操纵子受到阻遏蛋白的负性调节 真核基因调控的特点： 真核基因内含有多种RNA聚合酶 处于转录激活状态的染色质结构发生明显变化 在真核基因表达调控中以正性调节占主导 在真核