基因重缀烷技术概述.ppt

DNA重组技术前言 （1）I型限制酶属于复合功能酶，兼有修饰和切割DNA两种特性。 功能 核酸内切酶甲基化酶ATP酶DNA解旋酶 特点： 识别和切割位点不一致 没有固定的切割位点 随机切割 不产生特异片段  DNA重组技术 DNA重组技术： 按照人的意愿在体外对 DNA 分子进行重组， 再将重组分子导入受体细胞，使其在细胞 中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 （二）DNA聚合酶1、大肠杆菌DNA聚合酶I及其大片段（Klenow片段）（1）大肠杆菌DNA聚合酶I 特性：具有3种酶活性 5’ 3’外切功能 3’ 5’ 外切功能 聚合酶功能 5’ CCG 3’ GGCTATCGA5’ 聚合酶 dATP dTTP dGTP dCTP 5’ CCGATAGCT3’ 3’ GGCTATCGA5’ a.5’?3’DNA聚合酶活性 底物：单链DNA模板及带3’羟基的DNA引物 5’ CCG3’ 3’ GGC5’ 聚合酶 5’ CCGATAGCT3’ 3’ GGC5’ A T A G C T b.3’?5’外切酶活性 底物：带3’羟基的双链D