运用功能化修饰的碳纳米管针尖测量配体-受体的作用力.pdfVIP

第34卷 分析化学(FENXI 第3期 HUAXUE)研究简报 Chinese of 359～361 2006年3月 JournalAnalytical Chemistry 运用功能化修饰的碳纳米管针尖测量配体．受体的作用力 国立秋+ 王 锐 徐化明 梁 吉 (清华大学机械工程系，北京100084) 摘要电弧法自制碳纳米管原子力显微镜针尖，对其末端进行功能化修饰，然后测量配体-受体之间的作用 力。运用没有功能化修饰的碳纳米管针尖与修饰有亲和素分子的基底进行接触测量时，没有粘滞力出现；而 运用末端修饰生物素分子的碳纳米管针尖测量时，有粘滞力产生。功能化的碳纳米管针尖直接测得的粘滞力 ● 均大约200pN，此值符合一对配体生物素和受体亲和素之间的作用力。这一结果很难用传统的针尖获得，功 能化修饰的碳纳米管针尖能够克服传统针尖在力测量中的局限，在生物学和化学领域有着广泛的应用前景。 关键词原子力显微镜，碳纳米管，单分子力谱，粘滞力 1 引 言 force 基于原子力显微镜(atomic 泛的应用，然而AFM的普通针尖存在着严重的不足¨’2J。第一，普通针尖的曲率半径较大，很难精确控 制修饰分子的数量，影响测量的准确性；第二，普通针尖是锥形的，锥角一般为20～30。，如此大的锥角 很难精确控制修饰分子的方向和位置，影响测量的精度；第三，由于普通针尖的化学性质使其在测量中 会吸附空气或溶液中的污染物，影响测量的可靠性。 碳纳米管针尖能够克服普通针尖的不足，因为其末端的面积很小，经过修饰后可以将发生作用的分 子数目限制在几个量级上，甚至只有一个分子发生作用，而且修饰分子只能位于碳纳米管的末端，能准 确地控制修饰分子的方位口J。本研究运用多壁碳纳米管针尖(末端只有一根碳纳米管)，对其进行功能 间相互作用的机理提供更有价值的信息。 2 实验部分 2．1碳纳米管针尖的制作 在Leica倒置显微镜下，运用微操纵装置控制针尖和碳纳米管的位置，当二者之间还有几微米的距 离时，施加约20V电压，产生电弧，将碳纳米管笔直地吸附到AFM针尖上，然后氧化截短碳纳米管，获 得合适的长度。 2．2碳纳米管针尖和基底的功能化修饰 将碳纳米管针尖浸入含有5 mmol／L hydrochlo— ride，EDC，Sigma公司)和0．1 h。 公司)溶液中(pH6．0)，时间为2．0 将新剥离的云母片基底浸入含有250 bovineserum proyl—labelled albumin，Sigma公司)的磷酸盐(PBS)缓冲溶液(pH6．O)中2h，用PBS(pH 7．0)冲洗，然后放人含有30 h，这样亲 mg／L亲和素(streptavidinSigma公司)的PBS溶液(pH．r7．0)中2 和素蛋白分子通过与生物素分子作用而修饰在基底表面上。 2．3 AFM实验 AFM Instrument 实验在MuhiModeNanoscopeⅢa(DigitalUSA)原子力显微镜的液体池中进行，扫 t[殳稿；2005-08-22接受 2095-014-22 本文系国家自然科学基金(No．1033020200)和中国博士后科学基金(No．200