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临床免疫测定技术（各论） 凝集试验 Widal reaction Weil-felix reaction Wright test:布鲁菌病 交叉配血试验 相关帮助 需要相关抗体试剂的可以访问Fantibody全球抗体搜索引擎 fantibody全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的应用型检索平台 需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网biomean进行咨询，期待您的加入 Widal reaction（试管内凝集反应） 取： （1：10）待 检血清3.0ml 生理盐水 3.0ml/管 血型鉴定（玻片凝集反应）（直接） 1）正向间接凝集试验 (用抗原致敏载体--检测Ab) 2）反向间接凝集试验 间接凝集—(用抗体致敏载体----检测Ag） 3）间接凝集抑制试验 4) 协同凝集试验 (SPA抗体致敏------测抗原) 反向间接血凝试验(测Ag) (In fluid phase )絮状沉淀试验： (In gel phase )single gel diffusion test 影响因素: 1.抗原分子量：与扩散速度、沉淀环反相关 2.抗体种类：兔抗血清优于马、羊 3.抗体稀释度：抗体浓度大沉淀环小 4.扩散时间：抗原含量高，扩散时间长 5.扩散温度：4～37℃内温度与扩散速度正相关 6.琼脂板厚度：与沉淀环反相关 double gel diffusion test 琼脂双向扩散试验的应用 1.检测未知抗原或抗体 2.抗原性质分析 3.抗体效价滴定 4.抗原或抗体纯度鉴定 1.检测未知抗原或抗体 A: 浓度Ag、Ab及扩散率近似； B：浓度Ag、Ab近似，扩散率Ag＞Ab ； C：浓度Ag、Ab近似，扩散率Ag＜Ab D：浓度Ag＞Ab，扩散率近似； E：浓度Ag＞Ab，扩散率Ag＞Ab ； F：浓度Ag＜Ab，扩散率Ag＜Ab ； 2.抗原性质分析 3.抗体效价滴定 4.抗原或抗体纯度鉴定 免疫浊度试验(略) 免疫球蛋白的检测（简） 免疫固定电泳（测M蛋白） CH50(complement hemolysis 50%). 原理：组分和功能完整 的补体系统能使抗体致 敏的羊红细胞（SRBC） 发生溶血反应。在一定 范围内，SRBC溶血程度 与补体总活性成正相 关。以溶血百分率作纵 坐标，相应的血清量为 横坐标绘图，在一个适 当的、稳定的反应体系 中，溶血程度与补体剂 量依赖呈一个S形曲线 Enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） 原理（Principle）：将抗原或抗体结合到 某固相载体表面，保持其免疫活性，测定时, 把被测sample和conjugate按不同的步骤与固 相载体上的immunosorbent反应。用洗涤的方 法使与固相载体上形成的immunocomplex与其 他物质分开，再加入酶反应substrate，经酶 的催化作用后substrate变为有色产物。产物 的量与标本中被检物的量直接相关。 ELISA操作的基本步骤： 标本的收集、运送和保存 试剂准备 加样 温育 洗板 显色 比色 结果判断 结果报告及解释 1、标本的收集、运送和保存 ELISA检测分析用标本— 血清（浆） 特殊项目用： 唾液、脑脊液、尿液、粪便等 ELISA检测分析的对象— 病原体抗原/抗体 Tumor mark、hormone、cytokine et al 采集、运送与保存的注意点： 采集时间、运送条件、暂存点温度 可能影响测定结果的标本因素 一、内源性（标本内） 类风湿因子（rheumatoid factor） 补体（complement） 异嗜性抗体（heterophilic antibody） 治疗或诊断用鼠抗体（抗鼠抗体） 自身抗体或溶菌酶等 二、外源性（操作） 溶血、反复冻融 细菌污染 储存时间过长 标本凝固不全 对策： 1、稀释标本 2、改变选用的酶标抗体 3、预封闭（变性IgG