细菌总屎妄的测定.pptVIP

实验四 细菌总数的测定 ——纯种分离 一、目的 1.掌握从环境（土壤和活性污泥等）微生物群体中获得纯种微生物的分离和培养技术。 2.掌握无菌操作技术。 二、材料和器皿 1. 扭力天平、取土样工具、涂布棒(接种棒)。 2. 无菌三角瓶、试管、培养皿、移液管、玻璃珠。 3. 无菌水。 4. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基。 1、取土样 选定取样点，按对角交叉（五点法）取样。先除去表层约 2cm的土壤，将铲子插入土中数次，然后取2～10cm处的土壤。 盛土的容器应是无菌的。将5点样品约1kg充分混匀，除去碎 石、植物残根等。土样取回后应尽快投入实验，同时取10- 15g，称重后经105oC烘干8h，置于干燥器中冷却后再次称重， 计算含水量。 2、 倒平板 熔化已灭菌的上述4种培养基并冷却至45oC左右倒平 板，凝固待用，每种培养基每个稀释度各三只平板。 3、编号 取5支无菌空试管（15×150mm）依次编号为10-3、10-4、 10-5、10-6、10-7。 4、分装无菌水 按无菌操作用5mL移液管分别吸取4.5mL无菌水于编号的 各无菌空试管中。 5. 制备土壤稀释液 称土样1g于盛有99mL无菌水或无菌生理盐水并装有玻 璃珠的三角瓶中，振荡10～20min，使土样