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2011届华南师范大学硕士论文答辩 杂交一代棉花种群基因型辨识和种子生产的精准优化 学生：莫雪娇 专业： 植物学 导师：李晓方研究员 2011年5月27日 华南师范大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确的方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名:莫雪娇 2011年5月27日 研究背景 总的来说主要有以下几方面： 单基因型育种－遗传基础狭窄 生物多样性－日益衰竭 农业生产系统－脆弱 病虫害－加重 环境污染－愈演愈烈 可持续发展－挑战 推广的棉花多基因型种群品种（CD98、CD99和CD100）产量高、抗性好但存在以下问题： 1、组成比例不精确 2、制种难以保证种子质量 3、商业种种性不稳定 针对上述问题，李晓方研究员（2004）提出了多基因型育种思路。 一、实验原理 本论文以多基因型种群育种为理论基础，利用SSR分子标记技术进行种子精准化。 多基因型种群育种，就是用人工技术创造并培育多基因型种群品种的育种技术。 具体讲，就是利用众多亲本杂交，并保留绝大多数杂交重组体，通过后代的自交重组和稳定性繁殖，创造出成千上万个纯合稳定重组体，然后根据不同的选择标准和对品种特性的要求，把众多的同类型稳定单株或株系分类合并，即合并同类项的方法，形成多基因型种群品种。该方法可以最大限度的利用基因型不同但表现型相似的个体，形成多基因型种群品种，即利用不同基因型的遗传多样性，将遗传多样性与育种技术结合起来 通过对四个棉花群体进行研究，可以确定棉花种群中各个基因型的组成，和每个大群中单株数量占群体数量的百分比。来确定多基因型棉花种群各组分的精准比例，从而达到种子生产精准优化的目的，减少了种子生产成本，同时使种子的生产更加的简单易行。 在减少制种工作量的同时，也保证了遗传多样性 材料与方法 一、实验材料 四个群体的来源 CD100父本群：以南京农大选育的南农南抗材料为主，通过这些材料的不同家系与其他辅助材料杂交回交和系谱选择形成。 杂交F1代：通过共同的母本群和CD98、CD99以及CD100父本群组配杂交得到杂交一代种群。 CD98、CD99和CD100三个种群的亲本亲缘关系和基本特征如下表： 表2:CD98父本群亲缘关系和基本特征 二、试验方法 1、利用SSR分子标记技术对4个群体进行基因型辨识，应用聚类分析软件对其数据进行聚类 2、根据分子标记聚类分析结果，提出配套精确地制种生产方案 结果与分析 1、CD100父本群的实验结果与分析 1.1 CD100父本群SSR扩增产物的多态性分析 通过26对SSR引物对24个代表性单株进行筛选，选出了5对多态性效果好的引物，利用这些引物对CD100父本群的93个单株的DNA进行PCR扩增，结果列于表5 表5: 5对SSR引物在CD100父本群中的等位变异情况 1.2 CD100父本群的SSR聚类分析 由SSR分子标记聚类树状图可以看出，遗传相似系数变幅为0.02-1.00，在遗传相似系数为0.84时，93个单株组成的CD100父本群可以分为5个大类：  2、CD98F1的实验结果与分析 2.1 CD98F1SSR扩增产物的多态性分析 通过9对在CD98父本群和共同母本群有多态性的SSR引物对236个CD98F1单株的DNA进行PCR扩增反应，选出了4对多态性效果好的引物，结果列于表6 表6: 4对SSR引物在CD98F1中的等位变异情况 2.2 CD98F1的SSR聚类分析 由SSR分子标记聚类树状图可以看出，遗传相似系数变幅为0.08-1.00，在遗传相似系数为0.77时，236个单株组成的 CD98F1可以分为8个大类： 2.2 CD98F1的SSR聚类分析  3、CD99F1的实验结果与分析 3.1 CD99F1SSR扩增产物的多态性分析 通过11对在CD99父本群和共同母本群有多态性的SSR引物对200个CD99F1单株的DNA进行PCR扩增反应，选出了5对多态性效果好的引物，结果列于表7 表7: 5