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分光光度计的基本结构-分析化学
第九章 紫外-可见分光光度法 ◆学习目的 ◆知识要求 ◆能力要求 1.能够用朗伯-比尔定律解决定量计算问题 。 2.能够绘制吸收光谱曲线,找出被测物质的最 大吸收波长。 3.能够制备标准曲线,并能应用标准曲线对样品进行定量分析。 4.会使用常见的紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度。 第一节 光谱分析法概论 第一节 光谱分析法概论 一、电磁辐射与电磁波谱 电磁辐射:电磁辐射,也叫电磁波,具有波粒二象性。 c=λυ E=hυ 电磁波谱:把电磁辐射按照波长大小顺序排列起来,就称为电磁波谱。紫外光区和可见光区仅是电磁波谱中的一小部分。 表9-1 电磁波谱分区表 电磁辐射区段 波长范围 能级跃迁的类型 射线 10-3~0.1nm 原子核能级 X射线 0.1~10nm 内层电子能级 远紫外辐射 10~200nm 内层电子能级 紫外辐射 200~400nm 价电子或成键电子能级 可见光区 400~760nm 价电子或成键电子能级 近红外辐射 0.76~2.5μm 涉及氢原子的振动能级 中红外辐射 2.5~50μm 原子或分子的振动能级 远红外辐射 50~500μm 分子的转动能级 微波区 0.3mm~1m 分子的转动能级 无线电波区 1~1000m 磁场诱导核自旋能级 第一节 光谱分析法概论 二、光谱分析法的分类 发射光谱法:物质的原子、分子或离子在一定条件下,由低能态(基态)跃迁至高能态(激发态),再由高能态跃迁至低能态,同时产生电磁辐射,根据这种光谱而建立的分析方法称为发射光谱法。 吸收光谱法:利用物质对电磁辐射的选择性吸收而建立的分析方法称为吸收光谱法。紫外-可见分光光度法是其中重要的一种方法。 第一节 光谱分析法概论 三、紫外-可见分光光度的特点 1. 灵敏度高 2. 准确度高 3. 精密度好 4. 选择性好 5. 仪器设备简单,价格低廉,易于普及;操作简便,测定快速 6. 应用范围广泛 第二节 紫外-可见分光光度法 第二节 紫外-可见分光光度法 一、紫外-可见吸收光谱的产生 当分子(或离子)受到光照射时,能够吸收具有一定能量的光量子,由能量较低的基态能级E1跃迁到能量较高的激发态能级E2 ,即物质对光具有选择性吸收。 紫外-可见光的能量(h?)与分子(或离子)发生电子能级跃迁前后的能量差(E2-E1)恰好相等,电磁辐射与被测物发生能量交换,产生紫外-可见吸收光谱。 第二节 紫外-可见分光光度法 课堂互动 1.紫外-可见光的波长范围是 A.200~400nm B.400~760nm C.200~760nm D.360~800nm 2.下列叙述错误的是 A.光的能量与其波长成反比 B.有色溶液越浓,对光的吸收也越强烈 C.物质对光的吸收有选择性 D.光的能量与其频率成反比 第二节 紫外-可见分光光度法 课堂互动 3.紫外-可见分光光度法属于 A.原子发射光谱法 B.原子吸收光谱法 C.分子发射光谱法 D.分子吸收光谱法 4.分子吸收可见-紫外光后,可发生哪种类型的分子能级跃迁 A.转动能级跃迁 B.振动能级跃迁 C.电子能级跃迁 D.以上都能发生 第二节 紫外-可见分光光度法 二、透光率与吸光度 I0=Ia + It + Ir I0=Ia + It 透射光强度It与入射光强度I0 的比值称为透光率或透光度T。 第二节 紫外-可见分光光度法 第二节 紫外-可见
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