12章 蛋白得质结构.ppt

蛋白质结构 2．激素和它的前体分子 胰岛素和它的前体 （二）蛋白质的空间结构与功能的关系 以血红蛋白的别构效应为例说明蛋白质的空间结构与功能的关系 1．血红蛋白中血红素辅基的结构 2．血红素中的Fe2+与氧结合前后价数不变 3．血红蛋白与氧的结合 4．血红蛋白的别构效应(变构效应)（allosteric effect） 氧合作用显著改变Hb的四级结构，血红素铁的微小移动导致血红蛋白构象的转换（从T态→R态） T态（tense state）紧张态 R态（relaxed state）松驰态。 血红蛋白是由两个α-亚基和两个β-亚基组成的四聚体（α2β2），有稳定的四级结构，与氧的亲和力很弱，但当氧与血红蛋白分子中一个亚基的血红素辅基的铁结合后。即引起该亚基构象的改变，一个亚基构象的改变又会引起其余亚基的构象相继发生改变，亚基间的次级键被破坏，结果整个分子从紧密的构象变成比较松散的构象，易于与氧结合，使血红蛋白与氧结合的速度大大加快。 5.蛋白质的四级结构 四级结构是指蛋白质的亚基聚合成大分子蛋白质的方式（亚基是指一条多肽链或以共价链连接在一起的几条多肽链组成的蛋白质分子的最小共价结构单位）。 亚基与肽链 一般来说亚基不具有生物活性，即使有也很小，只有当这些亚基聚合成一个完整的蛋白质分子后，才具有生物活性。 血红蛋白四级结构的确定要归功于英国科学家Max.Perutz 下面以血红蛋白（hemoglobin）为例，说明蛋白质的四级结构，血红蛋白是由四个亚基组成，2个α-亚基，2个β-亚基，每个亚基由一条多肽链与一个血红素辅基组成 。４个亚基以正四面体的方式排列，彼此之间以非共价键相连（主要是离子键、氢键） 。 6．纤维状蛋白质的构象 （1）角蛋白（keratin） α-角蛋白 （2）丝心蛋白（也称丝蛋白，fibroin） （3）胶原蛋白（collagen） 7.维持蛋白质构象的化学键 维持蛋白质 构象的化学键 氢键、离子键、疏水键、范德华引力 二硫键、配位键 疏水键 二硫键 氢键 离子键 范德华引力 配位键 a 离子键 b 氢键 c 疏水键 d 范德华引力 六、蛋白质的理化性质 蛋白质是由氨基酸组成，因此蛋白质的性质与氨基酸相似，但由于蛋白质是由许多氨基酸通过肽键形成了大分子化合物，也就出现了一些新的性质。 （一）胶体性质 由于蛋白质分子很大，在水中形成胶体溶液。蛋白质主要是指球状蛋白质有亲水面，它的亲水基团都在表面，因此与水有很大的亲和力，成为亲水胶体。 蛋白质的亲水胶体溶液是相当稳定的，一方面由于蛋白质表面的亲水基团会吸引它周围的水分子，使水分子定向排列在它的周围，形成“水化层”。另一方面由于蛋白质在非等电点时带有同种电荷，同种电荷相斥，也使蛋白质分子保持一定的距离而不会聚合。 （二）酸碱性质和等电点 1. 蛋白质分子的可解离基团 2. 等电点 在某一pH值时，蛋白质所带的正电荷与负电荷恰好相等，即净电荷为零，此时溶液的pH值就是蛋白质的等电点。 每种蛋白质都有它特有的等电点，这也是鉴别蛋白质的指标之一。 蛋白质的酸性氨基酸和碱性氨基酸含量与等电点的关系: 等电点和蛋白质分子中所含氨基酸的种类有关。 3. 等离子点 等离子点是蛋白质在不含其它溶质的纯水中，蛋白质所带净电荷为零时的溶液的pH值。等离子点是一个常数。 4．蛋白质等电点的测定 等电聚焦 （三）电泳 移动的速度 v = E · Z f (四) 变性作用（denaturation） 1．变性的概念和理论 概念：变性是指蛋白质受物理或化学因素的影响，使蛋白质分子原有的特定的空间结构发生改变，从而导致蛋白质性质的改变以及生物活性的丧失。 理论：吴宪提出 肽链从紧密有序结构→松散无序的结构 2．变性的因素 物理因素: 加热、紫外线、X-射线、超声波等。 化学因素: 酸、碱、有机溶剂、蛋白变性剂（尿素、盐酸 胍）、重金属盐等。 3．变性蛋白质的特性 （1）生物活性全部或部分丧失 （2）一些侧链基团暴露，可滴定基团增加 （3）一些物理化学性质的改变 （4）生化性质的改变 4．变性的可逆性 蛋白质的一级结构决定高级结构 （五）凝固作用 变性蛋白质互相凝聚或互相穿插在一起的现象称蛋白质的凝固。 （六）沉淀作用 1．加酸沉淀蛋白质 2．加中性盐沉淀蛋白质 3．加有机溶剂沉淀蛋白质 4．加重金属盐沉淀蛋白质 5．加生物碱试剂沉淀蛋白质 （七）沉降作用 什么是沉降？ 沉降速度：指离心时，蛋白质分子在单位时间内下沉的距离。 t：时间